人类体细胞染色体对电离辐射非常敏感，染色体畸变是反应电离辐射损伤的良好指标，它不仅出现的早而且持续时间长，已被用作生物剂量仪，能较准确地估算均匀或比较均匀的急性照射的生物剂量，对不均匀照射和局部照射准确性较差，肿瘤放疗为局部分次照射，影响因素复杂，必须通过大量的实验研究和积累丰富的临床资料才能得到某些规律。本文目的是通过放疗患者观察局部分次照射染色体畸变与累积剂量的关系。

材料和方法 1 病例选择和剂量分组

本观察共选择25例肿瘤患者，其中包括：肺癌8例，乳腺癌7例，脑胶原细胞瘤3例，脑垂体瘤2例，小脑髓母细胞瘤、喉癌、鼻咽癌、甲状腺癌、腮腺混合瘤各1例。其中7例未进行放疗和化疗作为对照，其余18例为放疗患者。放射是采用日本三菱ML-MⅢ型医用直线加速器，一次局部治疗量为2GyX线和/或电子线，每周照射5次，总剂量为50Gy。由于在治疗过程中发现加速器输出量不稳而停机检修，并对每例患者实际接受剂量进行了重新估算，患者在最后一次照射后1.5个月左右进行了外周血淋巴细胞染色体畸变观察，现将各种肿瘤例数和累积剂量列于表 1。

2 染色体培养和分析方法

染色体培养采用提早加秋水仙素法^[1]，将0.3毫升肝素化全血加入盛有混合培养基（RPMI1640液3毫升，新生牛血清1毫升，青链霉素及PHA适量），同时加入秋水仙素，最终浓度为0.03微克/毫升，PH7.2~7.4，37℃恒温培养到48小时收获，低渗，、固定后，火焰干燥法制片，Giemsa染色。

选择染色体长度适中、分散良好的中期分裂相，每例分析200个46±1个染色体的中期细胞，记录染色体型畸变，包括双或多着丝粒体、着丝粒环、无着丝粒环、断片、微小体和易位等，双或多着丝粒体及着丝粒环的伴随性断片为互换的一部分，不另计数。采用盲法阅片，发现畸变时应征得第二者确认，并记下显微镜座标。各类畸变均以百分数（%）表示。

结果

共观察了4367个分裂中期细胞，按以下类型进行统计分析。（1）“双+环”，包括双或多着丝粒和着丝粒环；（2）无着丝粒畸变，包括多余断片、微小体和无着丝粒环；（3）易位；（4）畸变细胞，为含各类染色体型畸变的细胞；（5）总畸变，为各类染色体型畸变之和。将结果列于表 2。

从表 2可见，未进行放疗或化疗的对照组肿瘤患者，外周血淋巴细胞各类染色体畸变率很低，在正常范围内。而在放疗后除易位外各类型染色体畸变明显增加，差异非常显著（P < 0.01）。将肿瘤按头颈部和胸部分组，在局部平均累积剂量接近时，胸部肿瘤放疗患者染色体畸变率明显高于头颈部肿瘤放疗患者，差异有非常显著性意义（P < 0.01）。

将染色体畸变率和累积剂量间进行相关和回归分析。结果表明，头颈部或胸部肿瘤放疗后各类染色体畸变和累积剂量呈良好的相关性，（见表 3），回归方程式为直线方程（），回归系数显著，方程式成立（见表 4）。

讨论

早在1960年Tough^[2]发现强直性脊椎炎患者经放疗后外周血淋巴细胞染色体结构畸变有明显增加。此后国外有不少关于放疗后染色体畸变的报道。多数是研究淋巴细胞寿命，只有部分是研究染色体畸变的剂量效应关系。多数研究结果表明，实体恶性肿瘤外周血淋巴细胞染色体畸变不增高，属正常范围。放疗后外周血淋巴细胞染色体畸变率明显增加，并与累积剂量有一定关系。Schmid等^[3]对各种妇科肿瘤病人，受镭和x线联合治疗后25年染色体变化作了研究，发现非稳定性染色体畸变在照后第1年并无显著减少，而照后1~3.5年迅速下降，在第15年仍比对照组为高。而稳定性染色体畸变是较恒定的^[4]。Stenman等^[5]观察26例乳腺癌患者接受x线治疗后，染色体畸变率与累积剂量呈线性关系，与本研究结果相一致。

在局部照射条件下，外周血淋巴细胞染色体畸变产额，主要取决于：沉积在受照部位的辐射能量和照射持续时间；受照区域和体积；外周血中淋巴细胞数及其受照时处于受照区域的时间；受照区域有无淋巴组织及照后采血时间等。所以在本研究中，出现在相同累积剂量条件下，胸部肿瘤放疗后染色体畸变率明显高于头颈部肿瘤的现象，就不难理解了。

在均匀和比较均匀的急性全身照射时，染色体畸变是符合泊松分布的^[6]。在本观察中，发现多畸变细胞较多，故将染色体畸变（双十环）率较高的部分病例进行了频数分布的分析。根据实际频数（观察值）按泊松分布计算理论频数（见表 5）。从表 5可见，实际频数和理论频数差异较大，x²检验有显著或非常显著性意义。表明，局部分次照射情况下，染色体畸变呈偏离泊松分布的特点。

综上所述，医用直线加速器放疗后1.5个月，患者外周血淋巴细胞染色体畸变明显高于对照组，各类畸变率和累积剂量呈良好相关性，并具有偏离泊松分布的特点。表明，局部分次照射，尽管空间和时间上是不均匀的影响因素复杂，使剂量效应关系研究面临很多困难，但仍有一定的规律。本工作仅仅是初步的，尚须进一步深入研究。