药学学报  2016, Vol. 51 Issue (4): 613-615   PDF    
花花柴中一个新的苯丙素苷
何江波1, 牛燕芬1, 陶剑1, 贾静1, 王波1, 张雪梅1, 何方1, 朱华结2     
1. 昆明学院医学院, 云南昆明 650214;
2. 河北大学手性药物研究中心, 药物化学与分子诊断教育部重点实验室, 河北保定 071002
摘要: 采用硅胶柱色谱、反相RP-18柱色谱等方法,从花花柴中分离得到3个苯丙素衍生物及3个其他苯环衍生物,其中化合物1为新的苯丙素苷类化合物,命名为花花柴素A。通过深入分析1D和2D NMR图谱以及质谱,确定了分离得到化合物的结构。
关键词: 苯丙素衍生物     花花柴     花花柴素A    
A new phenylpropanoid glycoside compound isolated from Karelinia caspia
HE Jiang-bo1, NIU Yan-fen1, TAO Jian1, JIA Jing1, WANG Bo1, ZHANG Xue-mei1, HE Fang1, ZHU Hua-jie2     
1. School of Medicine, Kunming University, Kunming 650214, China;
2. Key Laboratory of Medicinal Chemistry and Molecular Diagnosis of Ministry of Education of PRC, Chinese Center for Chirality, Hebei University, Baoding 071002, China
Abstract: To study the constituents of Karelinia caspia (Pall.) Less, three phenylpropanoid derivatives and other compounds were isolated by silica gel, RP-18 chromatographic methods. Compound 1 was a new phenylpropanoid glycoside named as kareline A. Their structures were determined by spectroscopic analysis, including 1D- and 2D-NMR and mass spectrometry.
Key words: phenylpropanoid derivative     Karelinia caspia     kareline A    

花花柴 (K. Caspia) 属于菊科花花柴属植物,广泛分布于新疆、甘肃和内蒙古等地[1]。花花柴通常与胀果甘草和罗布麻等传统中药生长在一起,是一种著名的耐旱植物,其生长地主要为贫瘠的荒漠及半荒漠盐碱地带[2, 3, 4]。目前对其应用的研究较少,为了充分发掘其生物活性成分,作者从新疆采集花花柴,然后经过90%乙醇提取,并对乙酸乙酯萃取部位进行系统分离,得到6个化合物,其中包括一个新的苯丙素苷 (图 1)。结合文献核磁数据分析,分得的已知化合物分别被确定为2-羟基-3-甲氧基-5-(2-烯丙基) 苯酚 (2)[5]、松柏醛 (3)[6]、3,4-二羟基苯甲醛 (4)[7]、芍药醇 (5)[8]和4-甲氧基苯甲醛 (6)[9]。本文主要报道化合物1的提取分离和结构推断过程。

Figure 1 The structure of compounds 1-6
结果与讨论

化合物1 无色油状物。通过高分辨质谱HR- EI-MS m/z 342.130 8 (calcd. for C16H22O8,342.131 5 [M]+),确定该化合物分子式为C16H22O8,含有6个不饱和度。红外图谱表明存在羟基 (3 420 cm-1) 和双键 (1 595 cm-1) 信号。化合物1氢谱 (表 1) 显示该化合物含有一个甲氧基δH 3.80 (s,-OCH3) 和一个烯基δH 5.92 (m,H-8)、δH 5.07 (dd,J = 16.5,2.0 Hz,H-9a)、δH5.03 (dd,J = 11.5,2.0 Hz,H-9b),以及一个葡萄糖基δH 4.63 (1H,d,J = 7.6 Hz,H-1')、δH 3.47 (1H,m,H-2')、δH 3.41 (1H,overlap,H-3')、δH 3.44 (1H,overlap,H-4')、δH 3.25 (1H,m,H-5')、δH 3.79 (1H,dd,J = 12.0,2.0 Hz,H-6'a)、δH 3.71 (1H,dd,J = 12.0,4.4 Hz,H-6'b)。化合物1碳谱和DEPT谱表明该化合物含有16碳信号,其中包括1个甲氧基碳、3个亚甲基、8个次甲基和4个季碳原子。仔细分析化合物1的氢谱和碳 谱,可以初步推断为苯丙素糖苷类化合物。根据化合物1的二维图谱 (HSQC、HMBC和1H-1H COSY) 初步确定其平面结构。采用HSQC图谱归属碳氢信号,然后通过分析1H-1H COSY图谱 (图 2) 可以得到2个结构片段H-7/H-8/H-9和糖基链接信号H-2'/H-3'/ H-4'/H-5'/H-6'。通过HMBC图谱,相关信号从δH 3.80 (-OCH3) 到C-3,表明甲氧基与C-3相连。HMBC相关信号H-2、H-6和H-1' 到C-4,表明糖基连接C-4。糖基为β构型是根据其端基碳的偶合常数δH 4.63 (1H,d,J = 7.6 Hz,H-1') 而确定。根据HMBC相关从H-7到C-1和C-8,确定烯丙基的位置。因此化合物1的结构可以确定,并命名为花花柴素A。

Figure 2 Key 1H-1H COSY and HMBC correlations of compound 1
实验部分

Waters Xevo TQ-S及Waters Autospec Premier p776质谱仪; Bruker AM-400、DRX-500及Avance 600 MHz核磁共振仪 (TMS作为内标,δ为ppm,J为Hz) 柱色谱用硅胶 (200~300目)、薄层色谱用硅胶GF254均为青岛海洋化工厂生产; Sephadex LH-20 (25~100 μm) 为Pharmacia公司产品; MCI CHP 20P (75~120 μm) 为日本三菱公司生产; RP-18 (40~60 μm) 为日本Daiso产品; 石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇等有机溶剂均为工业纯经重蒸后使用。显色剂为H2SO4 (10%) 的乙醇液。

花花柴 (K. caspia) 全草,2011年采于新疆维吾尔自治区,经新疆生态与地理研究所管开云研究员鉴定。目前该植物标本 (编号2011HHC) 存放于本实验室。

1 提取与分离

花花柴全草晒干,粉碎 (6.7 kg),采用95% 乙醇回流提取 (3 × 20 L,每次2 h),合并提取液并减压浓缩得浸膏约1.5 kg。将浸膏用热水混悬,然后采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次。合并萃取液得石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。其中乙酸乙酯部位约130 g,采用硅胶柱色谱 (12 cm× 120 cm,200~300目,氯仿-甲醇,100∶1~1∶1,V/V) 进行划段,根据TLC显色合并,分别得到8个组分 (Fr. A~H)。组分A (12.8 g) 采用硅胶柱色谱分离,洗脱剂为石油醚-丙酮 (1∶0~0∶1),梯度洗脱得到组分A1~A4。组分A2 (450 mg) 经过Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇,1∶1,V/V) 和硅胶柱色谱 (石油醚-丙酮,20∶1,V/V) 纯化得到化合物 2 (50 mg) 和3 (22 mg)。组分A3 (1.1 g) 采用反复Sephadex LH-20(氯仿-甲醇,1∶1,V/V) 分离得到化合物 5 (20 mg)。组分G (3.9 g) 采用Sephadex LH-20 (甲醇) 分离得到组分G1~G3。组分G1 (200 mg) 采用硅胶柱色谱 (5 g) 得到化合物6 (56 mg)。组分G2通过RP-18 (甲醇-水,10∶100~100∶0,V/V) 纯化得到化合物1 (30 mg) 和化合物4(15 mg)。

2 结构鉴定

化合物1 无色油状物; 旋光为[α] D24= +77.4 (c 0.2,氯仿-甲醇1∶1); 1H和13C NMR图谱见表 1; IR (KBr) vmax 3 420,2 924,2 850,1 595,1 461,1 353,1 108,1 067 cm-1; ESI-MS (negative) = 341 [M-H]-,HR- EI-MS m/z 342.130 8 (calcd. for C16H22O8,342.131 5 [M]+)。

Table 1 The NMR spectra data of compound 1 in CD3OD (400 MHz for 1H,100 MHz for 13C NMR)
参考文献
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