2015, Vol. 50
2. 天士力控股集团有限公司研究院 现代中药研究所, 天津 300410;
3. 天津中医药大学中西医结合学院, 天津 300193
2. Division of Modernized TCM, Tasly Holded Group Co., Ltd., Tianjin 300410, China;
3. School of Integrative Medicine, Tianjin University of TCM, Tianjin 300193, China
郁舒片由贯叶金丝桃、白芍、蒺藜、远志等8味纯中药制备而成,具有补肝肾、安神解郁的功效,主要用于轻中度抑郁症患者。方中贯叶金丝桃、白芍等单味药材的化学成分研究虽然 较多[1, 2, 3, 4],但不能代表各单味中药在复方中具有同样的化学成分,为阐明复方中药郁舒片的化学组成,进而明确和表征其药效物质,本项目组对郁舒片中类似成分进行富集,提高低含量成分甚至微量成分的含量,并分成不同
部位进行分析鉴定研究。本研究采用UPLC-ESI-IT- TOF/MS联用技术,对其氯仿提取物的化学组成进行分析研究。这种联用技术具有高效、高灵敏度、检测模式多样、分析速度快、数据信息丰富及数据处理 方便等特点,已被广泛应用于单复方中药的成分定性定量研究[5,6]、中药代谢成分研究[7]、入血成分研究[8,9]等方面。本实验根据对照品色谱信息、精确分子量信息、离子碎片信息及参考相关文献,对其中49种成分进行了鉴定,并归属了成分来源,为郁舒片的化学组成和质量控制研究奠定了基础。
材料与方法 仪器与试剂
超高效液相色谱仪 (日本岛津公司),配备SPD-M20A型检测器,LCMS-IT-TOF质谱仪 (日本岛津公司)。对照品: 邻苯三酚、香草醛、五味子醇乙、4'-O-苯甲酸芍药苷购自天津士蓝科技有限公司,含量≥98.0%; 五味子酚、五味子酯乙购自天津一方科技有限公司,含量≥98.0%; 阿魏酸、异嗪皮啶、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、芍药苷均购自中国食品药品检定研究院,除芍药苷含量为96.0% 外,其余对照品含量均≥98.0%。郁舒浸膏由天津天士力现代中药资源有限公司生产。 郁舒氯仿提取物的制备
取郁舒浸膏286.5 g,加蒸馏水200 mL,搅拌,用氯仿萃取3次,每次200 mL,合并萃取液,用蒸馏水500 mL洗涤两次,浓缩氯仿萃取液至稠膏,得郁舒氯仿提取物1.5 g。 供试品溶液和对照品溶液的制备
取郁舒氯仿提取物约10 mg,加甲醇10 mL,涡旋混合1 min,过微孔滤膜 (0.22 µm),得供试品溶液。取各对照品适量于10 mL量瓶中,加入甲醇,超声2 min,过微孔滤膜 (0.22 µm),得混合对照品溶液。 色谱条件
采用ENDEAVORSILTM C18 (100 mm × 2.1 mm,1.8 µm) 色谱柱; 流动相: A为0.1%甲酸水溶液,B为乙腈; 梯度洗脱程序为0～20 min,10%～20% B; 20～45 min,20%～40% B; 45～55 min,40%～99% B; 55～60 min,99% B; 60～65 min,99%～10% B; 流速: 0.4 mL·min-1; 柱温: 35 ℃; 样品温度: 20 ℃,进样量: 2 µL。 质谱条件
采用电喷雾电离离子源 (ESI),雾化气为高纯氮气,碰撞气为氩气,准确质量数用三氟甲酸钠作校正液,正负离子模式同时检测。碰撞气压力27 kPa,雾化气流速1.5 L·min-1,干燥气体氮气温度200 ℃,毛细管电压负离子模式3 kV,正离子模式4 kV,离子源温度为200 ℃,TOF区真空度1.8×10-4 Pa,离子累积时间30 ms,扫描范围m/z 100～1 000。
结果与讨论 1 样品主要色谱峰的鉴定及归属
根据正、负离子模式下测得离子峰的精确分子质量,利用分子式预测软件,并应用氮规则,在测得值与理论值误差范围内 (误差< ±5 ppm) 来分析其可能的分子式,再根据各色谱峰的碎片离子信息、文献数据以及建立的郁舒化学成分数据库的检索,并与12种对照品数据比对,共鉴定化合物49种,见表 1。
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Table 1 Compounds identified in the CHCl3 extract of Yushu tablets by UPLC-ESI-IT-TOF/MS in both negative and positive ion polarity modes. Proposed ions: a[M+K]+,b[M+HCOO]-,c[M+Na]+,d[M+NH4]+,e[M-H]-,others [M+H]+. Further confirmed with standard substances |
正离子模式下产生m/z 498、m/z 503离子,推测m/z 498离子为[M+NH4]+离子,m/z 503离子为[M+Na]+离子; 负离子模式下给出m/z 525、m/z 449、m/z 327离子,推测m/z 525离子为[M+CHOO]-离子,m/z 449离子是由[M+CHOO]-离子发生源内碎裂丢失一分子甲酸和CH2O形成的[M-H-CH2O]-碎片离子,m/z 327离子是由[M+CHOO]-离子发生源内碎裂丢失一分子甲酸、苯甲酸和CH2O形成的[M-H-CH2O-C7H6O2]-碎片离子,与对照品芍药苷的保留时间和碎片离子峰比对一致,参考文献[10]报道,推测此峰为芍药苷。 2.2 芍药新苷 (tR = 18.387 min) 的鉴定
负离子模式下产生m/z 507离子,推测为[M+CHOO]-离子; m/z 507离子在ESI-MS2负离子模式下给出m/z 461、m/z 339、m/z 177离子,推测m/z 461离子是由[M+CHOO]-离子丢失一分子甲酸形成的离子[M-H]-,m/z 339离子是由[M+CHOO]-离子丢失一分子甲酸和苯甲酸形成的[M-H-C7H6O2]-碎片离子,m/z 177离子是由[M+CHOO]-离子丢失一分子甲酸、一分子苯甲酸和C6H10O5形成的[M-H-C7H6O2-C6H10O5]-碎片离子,与文献[11]数据一致,推测此峰为芍药新苷。 2.3 4'-O-苯甲酰芍药苷 (tR = 30.710 min) 的鉴定
正离子模式下产生m/z 602离子,推测为[M+NH4]+ 离子; 负离子模式下产生m/z 629、m/z 583、m/z 553、m/z 431离子,推测m/z 629离子为 [M+CHOO]- 离子,m/z 583离子是由 [M+CHOO]- 离子发生源内碎裂丢失一分 子甲酸形成的 [M-H]- 离子,m/z 553离子是由 [M+ CHOO]- 离子发生源内碎裂丢失一分子甲酸和CH2O形成的[M-H-CH2O]- 碎片离子,m/z 431离子是由 [M+CHOO]- 离子发生源内碎裂丢失一分子甲酸、一分子苯甲酸和CH2O形成的[M-H-CH2O-C7H6O2]- 碎片离子,与对照品4'-O-苯甲酰芍药苷保留时间和碎片离子信息一致,参考文献[10]报道,推测该峰为4'-O-苯甲酰芍药苷。 2.4 6-O-苯甲酰白芍苷 (tR = 31.465 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 585离子,推测为准分子离子 [M+H]+; m/z 585离子在ESI-MS2正离子模式下给出m/z 319、m/z 267、m/z 123、m/z 106离子,推测m/z 319、m/z 267离子为分子结构中葡萄糖端基碳氧键断裂,形成的一对互补碎片离子 [C17H19O6]+ 和 [C13H15O6]+,m/z 123离子由准分子离子 [M+H]+ 丢失一分子苯甲酸形成的 [C7H7O2]+ 碎片离子,m/z 106离子由准分子离子 [M+H]+ 丢失苯甲酰基形成的[C7H6O]+碎片离子,结合精确分子量等数据,推测该峰为6-O-苯甲酰白芍苷。
以上萜苷类化合物均来源于白芍药材,从其结构推断可以看出: 萜苷类化合物在正离子模式下,常给出[M+Na]+、[M+H]+、[M+NH4]+ 离子,负离子模式下常给出 [M+HCOO]-、[M-H]- 离子。在ESI-MS2负离子模式下,[M+CHOO]- 离子常丢失一分子甲酸形成 [M-H]- 离子,这一特点有利于确定化合物分子量; 另一个显著特征是分子结构中的苯甲酰基、葡萄糖基均容易丢失中性分子苯甲酸和甲醛,形成离子强度很强的 [M-H-C7H6O2]-、[M-H-CH2 O]- 离子,葡萄糖基也易丢失,这些信息对确定化合物的分子量、推断结构和鉴定化合物都起到重要作用。 3 苯丙素类化合物结构的推断 3.1 异嗪皮啶 (tR = 9.062 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 223离子,负离子模式下给出m/z 221离子,推测m/z 223离子为[M+H]+ 离子,m/z 221离子为[M-H]- 离子,结合精确分子量数据,确定化合物分子量为222。在ESI-MS2正离子模式下,m/z 223离子给出m/z 208、m/z 190、m/z 162碎片离子,推测m/z 208离子为 [M+H]+ 离子丢失甲基形成的 [M+H-CH3]+ 碎片离子,m/z 190为 [M+H]+ 离子丢失甲基和一分子水形成的[M+H-CH3-H2O]+ 碎片离子,m/z 162为 [M+H]+ 离子丢失甲基、一分子水和CO形成的 [M+H-CH3- H2O-CO]+ 碎片离子; 在ESI-MS2负离子模式下,m/z 221离子给出m/z 206、m/z 207碎片离子,推测m/z 206、m/z 207离子为[M-H]- 离子丢失甲基形成的 [M- H-CH3]- 和 [M-H-CH2]- 碎片离子,与对照品异嗪皮啶比对一致,推测此峰为异嗪皮啶。 3.2 丁香树脂酚-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (tR = 16.548 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 598离子,负离子模式下给出m/z 579、m/z 625离子,推测m/z 598离子为 [M+NH4]+ 离子,m/z 625离子为[M+CHOO]- 离子,m/z 579离子是由 [M+CHOO]- 离子发生源内碎裂丢失一分子甲酸形成的 [M-H]- 碎片离子。在ESI- MS2 正离子模式下,m/z 598离子给出m/z 419、m/z 401、m/z 265、m/z 217碎片离子,推测m/z 419为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子NH3和C6H10O5形成的[M+H-C6H10O5]+ 碎片离子,m/z 401为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子NH3、一分子水和C6H10O5形成的[M+H- H2O-C6H10O5]+ 碎片离子,& lt; i>m/z 265为 [M NH4]+ 离子丢失一分子NH3、一分子2,6-二甲氧基苯酚 (C8H10O3) 和C6H10O5形成的[M+H-C8H10O3-C6H10O5]+ 碎片离子,m/z 217为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子NH3、一分子2,6-二甲氧基苯酚、甲氧基和C6H11O6形成的[M+ H-C8H10O3-C6H11O6-CH3O]+ 碎片离子,结合m/z 579离子在ESI-MS2负离子模式下,给出 丢失C6H10O5形成的m/z 417离子碎片 [M-H- C6H10O5]- 以及精确分子量数据,推测此峰为丁香树脂酚-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。 3.3 Tenuifoliside D (tR = 19.737 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 385离子,负离子模式下给出m/z 429离子,推测m/z 385离子为 [M+H]+ 离子,m/z 429离子为 [M+CHOO]- 离子,结合精确分子量数据,推测其分子量为384。在ESI-MS2正离子模式下,m/z 385离子给出m/ z 221、m/z 193、m/z 190碎片离子,推测m/z 221离子为 [M+H]+ 离子丢失糖基形成的 [M- C6H11O5]+ 碎片离子,即3,4,5-三甲氧基桂皮酰基离子 [C12H13O4]+,m/z 193离子为 [C12H13O4]+ 离子丢失CO形成的[C11H13O3]+ 碎片离子,m/z 190离子为[C12H13O4]+ 离子丢失一个OCH3形成的[C11H10O3]+ 碎片离子; 在ESI-MS2负离子模式下,m/z 429离子给出m/z 237离子,推测由 [M+CHOO]- 离子丢失一分子甲酸和C6H10O4形成的[M-H-C6H10O4]- 离子,即3,4,5- 三甲氧基桂皮酸碎片离子 [C12H13O5]-,推测此峰为tenuifoliside D。 3.4 五味子醇甲 (tR = 41.875 min) 和五味子醇乙 (tR = 46.292 min) 的鉴定
正离子模式下分别给出 [M+H-H2O]+强峰,即m/z 415和m/z 399离子,以及[M+NH4]+ (m/z 450和m/z 434离子) 及其发生源内碎裂丢失一分子NH3形成的 [M+H]+ 离子 (m/z 433和m/z 417离子),结合精确分子量数据,推测tR = 41.875 min 处化合物的分子量为432,tR = 46.292 min处化合物的分子量为416。在ESI-MS2正离子模式下,tR = 41.875 min处m/z 415离子给出m/z 384、m/z 369离子,推测m/z 384为 [M+H-H2O]+ 丢失一个OCH3形成的[M+H-H2O-OCH3]+ 碎片离子,m/z 369离子为[M+ H-H2O]+ 丢失一个OCH3和CH3形成的[M+H-H2O- OCH3-CH3]+ 碎片离子; tR = 46.292 min处m/z 434离子给出m/z 417、m/z 399、m/z 368、m/z 337离子,推测m/z 417为 [M+NH4]+ 离子丢失NH3形成的[M+H]+ 离子,m/z 399为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子水和NH3后形成的 [M+H-H2O]+ 碎片离子,m/z 417 [M+H]+ 和m/z 399 [M+H-H2O]+ 碎片离子的出现,进一步验证了先前的推断,m/z 368离子为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子水、一分子NH3和OCH3形成的[M+H -H2O- OCH3]+ 碎片离子,m/z 337离子为[M+NH4]+ 离子丢失一分子水、一分子NH3和2个OCH3形成的 [M+H- H2O-2OCH3]+ 碎片离子。分别与对照品五味子醇甲、五味子醇乙的保留时间、质谱数据比对一致,参考文献数据[12,13],tR = 41.875 min处色谱峰鉴定为五味子醇甲,tR = 46.292 min处色谱峰鉴定为五味子醇乙。 3.5 戈米辛D (tR = 45.348 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 548和m/z 401离子,ESI-MS2正离子模式下,m/z 548离子给出m/z 401、m/z 383、m/z 341离子,m/z 401离子给出m/z 341、m/z 352、m/z 337离 子,推测m/z 548离子为 [M+NH4]+ 离子,m/z 401离子为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子NH3和C6H10O3形成的[M+H-C6H10O3]+ 碎片离子,m/z 383离子为 [M+H- C6H10O3]+ 离子丢失一分子水形成的 [M+H-C6H10O3- H2O]+ 碎片离子,m/z 352离子为 [M+H-C6H10O3-H2O]+ 离子丢失OCH3形成的[M+H-C6H10O3-OCH3-H2O]+ 碎片离子,m/z 341离子由[M+NH4]+ 离子丢失一分子NH3、一个分子水、CH2CO和C6H10O3形成的[M + H- C6H10O3-H2O-CH2CO]+ 碎片离子,m/z 337离子为 [M+ H-C6H10O3-OCH3-H2O]+ 离子丢失一个甲基后形成的 [M+H-C6H10O3-CH3O-H2O-CH3]+ 碎片离子,参考文献[14]中戈米辛D的裂解方式,并结合精确分子量,推断该峰为戈米辛D。 3.6 当归酰戈米辛Q (tR = 49.105 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 548离子,进一步裂解产生m/z 431、m/z 432、m/z 372、m/z 356离子,推测m/z 548离子为[M+NH4]+ 离子,m/z 431、m/z 432离子为 [M+NH4]+ 离子丢失NH3和C4H7COO形成的[M-C4H7COO]+ 和 [M+H-C4H7COO]+ 碎片离子,m/z 372离子为 [M+H- C4H7COO]+离子丢失4CH3形成的[M+H-C4H7COO- 4CH3]+ 碎片离子,m/z 356离子为[M+H-C4H7COO]+ 离子丢失3CH3和CH3O形成的 [M+H-C4H7COO- 3CH3-OCH3]+ 碎片离子,结合精确分子量,此峰推测为当归酰戈米辛Q。 3.7 五味子酯乙 (tR = 50.180 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 415、m/z 532离子,m/z 532离子在ESI-MS2正离子模式下给出m/z 415、m/z 371离子,推测m/z 532离子为 [M+NH4]+ 离子,m/z 415离子为 [M+NH4]+ 离子丢失一分子NH3和一中性分子当归酸 (C4H7COOH) 后形成的 [M+H-C4H7COOH]+ 碎片离子,m/z 371离子为 [M+NH4]+ 离子丢失NH4+、CH3CO和一中性分子当归酸 (C4H7COOH) 后形成的 [M- C4H7COOH -CH3CO]+ 碎片离子,与对照品五味子酯乙色谱和质谱数据比对一致,参考文献[14],推测此峰为五味子酯乙,而不是结构类似的同分异构体五味子酯丙或戈米辛E。 3.8 五味子甲素 (tR = 51.672 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 417离子,推测为准分子离子 [M+H]+,ESI-MS2正离子模式下m/z 417离子给出m/z 402、m/z 316、m/z 301离子,推测m/z 402为 [M+H]+&l t;/ span> 离子丢失甲基形成的 [M+H-CH3]+ 碎片离子,m/z 316离子为[M+H]+ 离子联苯环断裂丢失C5H10碎片和甲氧基形成的 [M+H-C5H10-OCH3]+ 碎片离子,m/z 301离子为[M+H]+ 离子联苯环断裂丢失C5H10碎片、甲氧基和甲基形成的 [M+H-C5H10-OCH3-CH3]+ 碎片离子,参考文献数据[15],并与对照品五味子甲素数据比对一致,推测此峰为五味子甲素。 3.9 五味子乙素 (tR = 52.452 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 401离子,ESI-MS2正离子模式下m/z 401离子给出m/z 386、m/z 370、m/z 355、m/z 300、m/z 285离子,推测m/z 401离子为[M+H]+ 离子,m/z 386离子为[M+H]+ 离子丢失CH3形成的 [M+H-CH3]+ 碎片离子,m/z 370离子为[M+H]+ 离子丢失CH3O形成的 [M+H-CH3O]+ 碎片离子,m/z 355离子为[M+H]+ 离子丢失CH3O和CH3形成的 [M+H-CH3O-CH3]+ 碎片离子,m/z 300离子为[M+H]+ 离子丢失CH3O和C5H10形成的[M+H-C5H10-CH3O]+ 碎片离子,m/z 285离子为[M+H]+ 离子丢失CH3O、CH3和C5H10形成的[M+H-C5H10-CH3O-CH3]+ 碎片离子,参考文献[15] 数据,并与对照品五味子乙素数据比对一致,推测此峰为五味子乙素。
从苯丙素类化合物的裂解可以看出,香豆素类化合物易丢失环上的取代基,并且内酯环可失羰基; 木脂素类化合物的苯环上常常有含氧基取代,这些取代基很容易丢失; 联苯环辛烯环上如有羟基取代,易失水生成离子强度很强的离子,如五味子醇甲、五味子醇乙等; 如有羧基取代,也容易裂解丢失羧基取代,另外,联苯环辛烯环易断裂,丢失C5H10碎片,如五味子甲素、五味子乙素等,这些裂解规律,是鉴定木脂素类化合物的重要特征。 4 醌类化合物的结构推断 4.1 6-Hydroxy-1,2,3,7-tetramethoxyxanthone (tR = 30.173 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 333离子,负离子模式下给出m/z 331离子,结合精确分子量,推测其分子量为332。ESI-MS2正离子模式下m/z 333离子给出m/z 317、m/z 303、m/z 272、m/z 257离子,推测m/z 317离子为由分子离子丢失甲基形成 的 [M-CH3]+ 碎片离子,m/z 303离子为[M+H]+ 丢失2个甲基形成的 [M+H-2CH3]+ 碎片离子,m/z 272离子为[M+H]+ 丢失2个甲基和1个甲氧基形成的 [M+H- OCH3-2CH3]+ 碎片离子,m/z 257离子为 [M+H]+ 丢失3个甲基和1个甲氧基形成的 [M+H-OCH3-3CH3]+ 碎片离子,由此推测此峰为6-hydroxy-1,2,3,7-tetramethoxyxanthone[16]。 4.2 3-Hydroxy-1,2,7-trimethoxyxanthone (tR = 33.963 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 303离子,负离子模式下给出m/z 301离子,结合精确分子量,推其测分子量为302。ESI-MS2正离子模式下m/z 303离子给出m/z 2 88、m/z 270、m/z 180、m/z 177、m/z 132、m/z 122离子,推测m/z 288离子为[M+H]+ 丢失甲基形成的 [M+H-CH3]+ 碎片离子,m/z 270离子为 [M+H]+ 丢失一分子水和甲基形成的 [M+H-CH3-H2O]+ 碎片离子,m/z 180和m/z 122离子由分子结构中含氧环开环形成的一对互补离子[C9H8O4]+ 和 [C7H6O2]+,m/z 177离子为 [M+H]+ 丢失3个甲氧基和1个羟基后,再丢失环氧离子形成的 [M+H-3CH3O-OH-O]+ 碎片离子,m/z 132离子为[C9H8O4]+ 离子丢失甲氧基和羟基后形成的 [M-OC H3-OH-122]+ 碎片离子,由此推测该峰为3-hydroxy-1,2,7-tetramethoxyxanthone。 4.3 3-羟基-1-甲氧基-2-甲基蒽醌 (tR = 38.207 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 269离子,负离子模式下给出m/z 267离子,ESI-MS2正离子模式下m/z 269离子给出m/z 254离子,负离子模式下m/z 267离子给出m/z 224离子,推测m/z 269离子为 [M+H]+ 离子,m/z 254离子为 [M+H]+ 离子丢失甲基形成的 [M+H-CH3]+ 碎片离子,m/z 267离子为 [M-H]- 离子,m/z 224离子为[M-H]- 离子丢失甲基和羰基后形成的 [M-H-CO-CH3]- 碎片离子,结合精确分子量,推测该化合物为3-羟基-1-甲氧基-2-甲基蒽醌。 4.4 1,6-二羟基-2-甲氧基蒽醌 (tR = 48.060 min) 的鉴定
ESI-MS负离子模式下给出m/z 269离子,ESI- MS2负离子模式下m/z 269离子给出m/z 241、m/z 210、m/z 197、m/z 182离子,推测m/z 269离子为 [M-H]- 离子,m/z 241离子为[M-H]- 离子丢失羰基形成的 [M- H-CO]- 碎片离子,m/z 210离子为[M-H]- 离子丢失羰基和甲氧基后形成的 [M-H-CO-OCH3]- 碎片离子,m/z 197离子为[M-H]- 离子丢失2个羰基和1个羟基后形成的 [M-2CO-OH]- 碎片离子,m/z 182离子为[M-H]- 离子丢失2个羰基和1个甲氧基后形成的 [M- H-2CO-CH3O]- 碎片离子,结合精确分子量,推测该化合物为1,6-二羟基-2-甲氧基蒽醌。&l t;/ span>
从醌类化合物的ESI-MS数据可以看出,正负离子两种模式下离子响应都较好,能分别给出 [M+H]+ 和 [M-H]- 离子。在ESI-MS2模式下,分子结构中连接在苯环上的取代基,都比较容易丢失; 蒽醌类化合物易丢失羰基,口山酮类化合物的含氧环可开环生成互补离子对,这些特征对醌类化合物的结构推断能提供重要信息。 5 间苯三酚类化合物结构的推断 5.1 贯叶金丝桃素及其同分异构体 (tR = 58.812 min,58.932 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 537离子,负离子模式下给出m/z 535离子,结合精确分子量,推断其分子量为536。在ESI-MS2正离子模式下m/z 537离子给出m/z 411、m/z 355离子,推测m/z 411离子为[M+H]+ 离子丢失C3H7和C6H11碎片后形成的 [M+H-C3H7-C6H11]+ 碎片离子,m/z 355离子为[M+H]+ 离子丢失1个C3H8分子和2个C5H9碎片后 形成的 [M+H-C3H8-2C5H9]+ 碎片离子。参考文献[17,18],推测这两个峰为贯叶金丝桃素及其同分异构体。此两峰的质谱信息完全一致, < span style='font-family:宋体'>只是保留时间稍有差别,推测这两个化合物可能为立体异构体。 5.2 加贯叶金丝桃素 (tR = 59.662 min) 的鉴定
正离子模式下给出m/z 551离子,m/z 551离子在ESI- MS2正离子模式下给出m/z 519、m/z 355离子,推断m/z 551离子为 [M+H]+ 离子,m/z 519离子为[M+H]+ 离子丢失甲基和羟基形成的 [M+H-CH3-OH]+ 碎片离子,m/z 355离子为[M+H] + 离子丢失1个C4H10分子和2个C5H9碎片后形成的 [M+H-C4H10-2C5H9]+ 碎片离子,结合精确分子量,推测该峰为加贯叶金丝桃素。
间苯三酚类化合物主要由间苯三酚异戊二烯基的衍生物构成。分子结构中异戊二烯及其衍生物单元比较容易裂解丢失,形成一系列的碎片离子,如丢失C3H7、C5H9、C6H11等,可以作为此类化合物的鉴别特征。 6 小结
复杂的中药复方,要明确其药效物质基础,阐明其作用机制,应对其化学组成进行系统研究,这也是中药现代化的必由之路。研究复方中药的化学组成,首先应该对其复杂化学体系进行分类富集,再采用现代先进技术和设备,针对每一类成分分别进行研究,明确每一类成分的化学组成,进而明确整个复方的化学组成。根据这一研究思路,本实验对郁舒片其中一个部位的化学组成进行研究。采用正负离子同时检测模式,得到丰富的离子信息,结合超高效液相高灵敏度的特点,本实验在郁舒片氯仿提取物中检测到100余种成分,根据对离子峰的数据分析,结合精确分子量,并通过12种对照品色谱信息比对和参考相关文献,初步鉴定了49种成分,对主要成分的碎片离子进行了归属,提高了鉴定结果的可靠性。
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