梅迪维斯纳病(Maedi-Visna disease, MVD)是一种由梅迪维斯纳病毒(Maedi-Visna virus, MVV)引起的广泛存在于世界许多国家的绵羊慢病毒病，属于全身性疾病^[1]。该病是典型的慢性进行性疾病，主要病变出现在肺、中枢神经系统、关节和乳房，主要特征是潜伏期长、病程发展缓慢，一旦感染即为终身患病，抵抗力下降而易继发细菌、寄生虫及肿瘤感染，最后以死亡而告终，有文献报道该病还能造成新生羔羊体重下降及早期死亡等繁殖性能障碍^[2-4]。因其病变特征与其他疾病相似而常被混淆忽略。因此，MVD感染是影响养羊业发展的一个重要因素。

MVV属于反转录病毒科(Retroviridae)、慢病毒属(Lentivirus)的一员，与人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)有密切关系^[5]。MVV靶细胞可从区域淋巴结感染髓样前体细胞，再侵入血液循环系统，以最低转录率将病毒DNA带入血液，直到单核细胞在组织中成熟为巨噬细胞^[6]。1966年，MVD从澳大利亚传入我国，1984年，我国首次在新疆于田羊中分离并鉴定MVV^[7]。目前，MVD在中国已有云南、陕西和甘肃等12个地区不同程度的流行^[8-9]。但在新疆，缺乏对MVV的系统调查，对羊MVV的流行情况了解有限。本研究应用商品化ELISA检测试剂盒，初步调查新疆部分地区绵羊MVV感染的流行情况，提供有效数据，以帮助我国养羊业更好地发展。

1 材料与方法 1.1 样本与试剂

2017—2019年，本实验室从新疆阿勒泰、阿克苏、哈密、伊犁、石河子及昌吉州等地区收集阿勒泰羊、美利奴羊、哈萨克羊、萨福克羊、和田羊及小尾寒羊共2 647份血液样本，每批血液样离心制备血清，保存于-80 ℃，集中检测。梅迪维斯纳病毒抗体ELISA检测试剂盒，购自法国IDEVT公司；酶标仪购自Thermo公司。

1.2 抗体检测与结果判定

参照试剂盒说明书，使用样本稀释液1:20倍稀释样本血清，取100 μL加入酶标板各孔中，并加入阳性和阴性对照，在21 ℃下孵育45 min左右；使用洗涤液每孔300 μL洗4次后拍干；每孔中加入100 μL酶标二抗21 ℃孵育30 min左右；洗板；每孔加100 μL显色液21 ℃下孵育15 min后加终止液停止显色。使用酶标仪进行检测并记录。结果判定标准：当阳性对照平均值(OD_PC)大于0.35，阳性对照平均值比阴性对照平均值(OD_PC/OD_NC)大于3时，结果成立。S/P值≤50%时为阴性；当50% < S/P值< 60%时为可疑；当S/P值>60%时为阳性。对检测结果按照羊的品种、性别、地域等因素进行新疆地区梅迪维斯纳病流行病学分析。

2 结果 2.1 不同地区羊血清梅迪维斯纳病抗体检测

阿克苏、阿勒泰、巴州、昌吉、哈密、石河子和伊宁地区羊血清MVD抗体的阳性率分别为28.95%(121/418)、0.67%(5/751)、2.50% (2/80)、4.91% (8/163)、1.14% (3/264)、1.22% (1/82)和17.10%(152/889) (表 1)。其中阿克苏地区羊MVD阳性率最高，伊宁地区次之，与阿勒泰、巴州、昌吉、哈密和石河子相比差异显著。伊宁地区的哈萨克羊血清的MVD抗体阳性率高达51.69%(107/207)，而阿克苏富蕴县的MVD阳性率为1.50%(4/266)，表明MVD感染在羊中存在地区差异。

2.2 不同品种羊血清梅迪维斯纳病抗体检测

阿勒泰羊、和田羊、哈萨克羊、美利奴羊、萨福克羊、小尾寒羊的MVD抗体阳性率分别为0.35% (1/288)、1.14% (3/264)、22.87%(231/1010)、13.86%(42/303)、1.85%(13/702)和2.50 % (2/80)。其中哈萨克羊血清的MVD抗体阳性率最高，美利奴羊次之(图 1)。表明MVD感染在羊中存在品种差异。

2.3 不同属性羊血清梅迪维斯纳病抗体检测

新疆本土品种包括阿勒泰羊、和田羊和哈萨克羊，引进品种包括美利奴羊、萨福克羊和小尾寒羊。剔除新源及拜城地区，其他地区本土品种羊与引进品种羊血清MVD抗体阳性率分别为0.79 % (8/1 015)、1.58 % (15/947)，引进品种是本土品种的一倍左右(表 2)。表明MVD感染在引进和本土品种羊中存在差异。

公羊与母羊血清MVD抗体阳性率分别为3.59 % (34/946)、15.17 % (258/1 701)，二者间差异显著(表 2)。表明MVD感染在羊中存在性别差异。

3 讨论

目前，国内对MVD的分布、流行情况及变化规律缺乏系统的研究报告，所了解到仅有较少部分研究者使用琼脂免疫扩散试验或酶联免疫吸附试验等方法对我国部分地区进行了MVD感染状况调查^[10-12]。世界动物卫生组织OIE及国标规定病毒分离鉴定(VI)、核酸检测技术、琼脂免疫扩散试验(AGID)以及酶联免疫吸附试验(ELISA)等可用于国际贸易，是检测MVD的标准方法，有结果准确、特异性好和敏感性高等特点^[13-14]。但病毒分离鉴定、核酸检测技术、琼脂免疫扩散试验也存在操作繁琐、检测耗时长等缺点，而ELISA方法具有成本低、安全、特异性和灵敏度较高、方便在基层推广应用，大规模进行血清调查的优点，被众多养殖场广泛使用^[15]。

通过对新疆地区绵羊血清样品进行MVD抗体检测，初步分析MVD的流行情况，发现MVD的感染率具有地域差异，这与文献中研究结果一致^[16]。2012年，Zhang等^[8]报道在我国的MVV血清阳性率安徽最低(4.60%)，云南及广州最高(50%)，也论证了不同地区阳性率存在显著差异。本研究结果显示拜城和新源的哈萨克羊MVD的感染率显著高于其他地区，这或许与饲养环境及饲养品种等其他因素有关。新疆伊宁新源县某场疑似感染MVV，该场哈萨克羊的阳性率为51.69%，美利奴羊阳性率为30.43%，显著高于其他地区MVV的抗体阳性率。咨询养殖农户得知该场曾在2018年冬季死亡羊只达60余头，造成了一定的损失。农户主描述该场采用半规模化养殖方式，多为年龄2~4岁的母羊，冬季采取室内圈养模式，饲养密度大，地面环境潮湿。长此以往，极易导致MVD的流行。

排除新源及拜城两个地区哈萨克羊与美利奴羊的较高感染率之外，其他检测品种绵羊的感染率在新疆阳性率均较低。本土品种与引进品种羊血清MVD抗体阳性率分别为0.79%和1.58%，引进品种高于本土品种。MVD最开始发现于冰岛，曾严重威胁当地羊产业的发展，而后逐渐发现于大多数养羊的国家^[17]。目前，我国出现该病，并呈现一定的流行趋势，这提示人们在引进新品种时，应当严格遵守进口检疫程序，避免造成生物安全的威胁。对于现在的状况，也应当多加防范，降低MVD在中国的流行率。除此之外，在阳性羊中，公羊MVD抗体阳性率为3.59%，而母羊高达15.17%，两者差异显著，这与母羊比公羊更易感MVV的报道相符合^[18]。虽然目前在我国还未呈现高发状态，但对于该病不可逆死亡的结果值得关注。

血清学调查会受到采样时间、受检测时机及其他因素的影响，调查结果往往会有所差异^[18]。MVV的长期潜伏性与免疫机制的复杂性，使得羊场对MVV的防控仍然面临着压力与挑战，做好MVD的进出口检疫、早期检疫并淘汰病羊等方法是防控MVD感染的重要举措。目前，文献中所描述MVD主要是通过呼吸道气溶胶、初乳或乳汁来进行传播，公羊的精液传播也是造成MVV感染的重要因素^[19]。建议规模化羊场做好日常消毒工作、加强种公羊精液检测及后备母羊的MVD引种检测、隔离、驯化及适时淘汰老龄经产母羊，加速羊场更新，以降低羊场MVD的流行。

4 结论

通过对新疆地区绵羊血清样品进行梅迪维斯纳病抗体检测，发现其感染率具有地域差异、品种差异、性别差异等，可为梅迪维斯纳病的控制提供资料。