2. 农业微生物学国家重点实验室, 武汉 430070;
3. 生猪健康养殖协同创新中心, 武汉 430070
, ZHU Xianjing1,2,3, SUN Qi1,2,3, KU Xugang1,3, LUO Rui1,2, FAN Shengxian1, HE Qigai1,2,3
2. State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Wuhan 430070, China;
3. The Cooperative Innovation Center for Sustainable Pig Production, Wuhan 430070, China
伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)感染引起的一种急性、热性传染病[1-2]。猪是感染PRV后唯一可以存活的物种，因此，猪是PRV唯一的自然宿主和储存宿主[3]。所有日龄的猪均易感PRV，仔猪阶段死亡率最高，其他阶段猪发病后多能耐过，或呈隐性感染状态，感染猪往往终身带毒，即使是处于潜伏感染状态的猪也能向体外排出大量病毒[3]。母猪感染后多见繁殖障碍，主要表现为屡配不孕、返情率高、妊娠期流产、产死胎和木乃伊胎等；公猪多表现为睾丸肿胀、睾丸炎、睾丸萎缩等不同症状，病猪失去种用价值[4-5]。该病还可继发细菌性疾病的感染[6]，目前有学者报道，PRV可以跨物种传播给人类，可导致感染者患有严重的神经系统后遗症，表现出失明、记忆障碍、最低意识状态以及持续性植物人状态[7]。
我国学者于1948年首次报道了PRV感染病例并成功在猫体内分离到了病毒。随后，我国学者陆续分离到一些代表性的PRV毒株，并在此基础上研制出了我国第一代PRV疫苗，使得PRV在我国的流行得到了有效的控制，并逐步开始PR根除计划[8-9]。根据《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》，在2020年，全国所有种猪场达到猪伪狂犬病净化标准，但由于我国养殖总量较大、散养户较多，且2011年后变异PRV株的出现，加大了我国净化PR的难度[10-11]。目前，全国种猪场已按照国家标准开展PR净化工作。但由于PRV可在猪只体内潜伏感染，所以，该病在很多猪场呈隐性感染状态，国内很多隐性感染商品猪场认为猪只未发病则可不净化或减缓净化速度。
本研究通过比较某规模化猪场中PRV野毒gE抗体阳性头胎母猪与gE抗体阴性头胎母猪生产成绩的不同，探索PR阳性稳定猪只生产成绩的情况，反映PR净化对提高生产成绩的必要性。
1 材料与方法 1.1 猪场背景信息本研究对2017年投入生产的一个新建二元母猪商品场进行调查。该猪场设计存栏母猪1万头，公猪128头，使用一头公猪的精液进行两次深部输精技术配种。其中，后备公、母猪于185日龄免疫猪瘟病毒疫苗，192日龄免疫细小病毒和乙脑病毒疫苗，200日龄免疫口蹄疫疫苗，207日龄免疫伪狂犬病活疫苗，214日龄免疫蓝耳病灭活疫苗。该场在2017年底引种过程中暴发伪狂犬病，后经紧急免疫伪狂犬病灭活疫苗，配合生产管理、控制人流物流、灭鼠等系列措施，成功控制了此次疫情，进入伪狂犬病阳性稳定阶段。
1.2 收集队列研究数据本研究跟踪调查该场在2018年3—7月生产且断奶的母猪各项生产成绩，共收集该场1 545头第一胎母猪的生产信息。包括窝产总仔数、健仔(标准：初生重高于0.8 kg且活力好的仔猪)、弱仔(标准：初生重低于0.8 kg或活力差的仔猪)、死胎、木乃伊胎、活仔初生窝重、断奶活仔数、21 d断奶合格仔(标准：体重大于等于5.0 kg，无残缺的健康仔猪)、仔猪断奶重等信息。
1.3 猪群PRV野毒gE抗体检测对跟踪调查的1 545头一胎母猪和配种的78头公猪采集静脉血液样品，保存在5 mL无抗凝剂的采血管中，血液样品置37 ℃温箱温育30 min，3 000 r·min-1离心5 min，分离血清，4 ℃保存备用，要求血清清亮，无溶血。血清使用IDEXX gE-ELISA抗体检测试剂盒(敏感性和特异性分别为96.7%和99.8%)检测抗体水平。检测方法参考试剂盒说明书。
1.4 数据处理活仔数=健仔数+弱仔数；断奶活仔率(%)=断奶活仔数/出生活仔数×100；断奶合格率(%)=断奶合格仔数/断奶活仔数×100。本研究使用两种常用的显著性检验方法，一种为适用于两组数据平均数分析的方差齐性检验，一种为适合于离散型变量分析的卡方检验。P>0.05认为差异不显著，*P < 0.05认为差异显著，**P < 0.01和***P < 0.001认为差异极显著。
2 结果 2.1 抗体检测结果及各项生产数据统计检测采集的1 545头母猪与78头公猪血清中gE抗体，其中78头公猪和1 104头母猪为PRV野毒gE抗体阴性，441头母猪为gE抗体阳性。其中，PRV野毒gE抗体阴性母猪的活仔初生总重和断奶活仔总重分别为18 707 kg和57 755 kg，gE抗体阳性母猪的活仔初生总重和断奶活仔总重分别为7 342.5 kg和23 639.5 kg，其余生产数据见表 1。
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表 1 PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪各项生产数据 Table 1 Production data of wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
分析PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪产仔情况可知，每头gE抗体阴性母猪每胎次提供的总仔、活仔和健仔数均显著高于gE抗体阳性母猪每胎次提供的仔猪数(P＜0.05)。其中，gE抗体阴性母猪每胎次提供(11.96±1.33)头活仔猪，比gE抗体阳性母猪每胎次多提供0.63头活仔(P < 0.001)。但gE抗体阴性母猪每胎次提供弱仔数为(1.01±0.53)头，极显著高于gE抗体阳性母猪的(0.66±0.41)头(P＜0.001)，具体情况见图 1。
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*.P < 0.05; **.P < 0.01;***.P < 0.001。下同 *.P < 0.05; **.P < 0.01;***.P < 0.001.The same as below 图 1 PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪每胎次产仔情况 Fig. 1 Perinatal litter status of wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
分析PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪产仔总数发现，gE抗体阴性母猪所产活仔数占产总仔数的89.67%，显著高于gE抗体阳性母猪活仔比(P＜0.05)。其中gE抗体阴性健仔数占比达82.07%，显著低于gE抗体阳性母猪的83.29%(P＜0.05)，所产弱仔数极显著高于gE抗体阳性母猪(P＜0.001)，但gE抗体阴性母猪所产死胎数和木乃伊胎数均低于gE抗体阳性母猪，可见gE抗体阴性母猪产仔情况总体好于gE抗体阳性母猪。具体情况见图 2。
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图 2 PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪生产成绩分析 Fig. 2 Analysis of production performance of wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
PRV野毒gE抗体阴性母猪每窝产仔数极显著高于gE抗体阳性母猪，分析gE抗体阴性母猪产仔窝重为(16.94±1.91) kg·窝-1，略高于gE抗体阳性母猪的产子窝重(16.65±1.94) kg·窝-1 (图 3)，但差异不显著(P>0.05)，可见窝重基本相似。但gE抗体阴性母猪所产活仔均重为(1.42±0.06) kg·头-1，极显著低于gE抗体阳性母猪所产活仔均重(1.47±0.03)kg·头-1(P＜0.001)，如图 4。
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a.PRV野毒gE抗体阴性；b.PRV野毒gE抗体阳性 a.PRV gE antibody negative; b.PRV gE antibody positive 图 3 PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪产仔平均窝重 Fig. 3 Average litter weight of birth of wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
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a.PRV野毒gE抗体阴性；b.PRV野毒gE抗体阳性 a.PRV gE antibody negative; b.PRV gE antibody positive 图 4 PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪产活仔个体平均重 Fig. 4 Average live weight of piglets born of wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
分析PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪所产仔猪断奶情况(图 5)，gE抗体阴性母猪每胎次可提供断奶活仔(9.86±1.48)头，比gE抗体阳性母猪可多提供0.18头断奶活仔。gE抗体阴性母猪每胎次可提供合格断奶仔猪(9.71±1.50)头，比gE抗体阳性母猪多提供0.28头合格断奶活仔，但差异不显著(P>0.05)。
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图 5 PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪每胎次提供断奶仔猪数 Fig. 5 The number of weaned piglets provided by wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
如图 6所示，PRV野毒抗体gE阴性猪每胎次仔猪的断奶成活率为82.43%，极显著低于gE抗体阳性母猪的85.65%(P＜0.001)，但gE抗体阴性母猪每胎次提供的断奶合格活仔占断奶活仔数的98.55%，极显著高于gE抗体阳性母猪的97.49%(P＜0.001)。分析PRV野毒gE抗体阴性和阳性母猪所产仔猪断奶重，结果如图 7所示，gE抗体阴性母猪所产仔猪21日龄断奶均重为(5.31±0.19) kg·头-1，极显著低于gE抗体阳性母猪所产仔猪断奶体重(5.54±0.28) kg·头-1(P＜0.001)。说明gE抗体阳性母猪所产仔猪个体重均大，但断奶合格活仔率低，表明gE抗体阳性母猪的断奶活仔个体大小不一，断奶仔猪整齐度较差。
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图 6 PRV野毒抗体gE阴性和阳性母猪断奶成活率及断奶合格率 Fig. 6 The proportion of weaned piglets provided by wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
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a.PRV野毒gE抗体阴性；b.PRV野毒gE抗体阳性 a.Wild type PRV gE antibody negative; b.Wild type PRV gE antibody positive 图 7 PRV病野毒gE抗体阴性和阳性母猪所产仔猪断奶重 Fig. 7 Weaning weight of piglets provided by wild type PRV gE antibody negative and positive sows |
在猪等多胎动物中，单个胎儿的生长受到同窝竞争的影响。子宫内的竞争极大地影响了出生后的性状，例如出生体重和生命力[12]。由于母猪子宫容积和给胎儿提供养分的能力有限，如果产仔数多，则平均给每个胎儿的营养则相应较少，仔猪的初生重就会降低，有研究表明，与产仔少的母猪相比，产仔数多的母猪其分娩轻型出生体重仔猪的百分比会增加。这种现象在头胎母猪尤为明显[13-16]，Quiniou等[17]研究显示，产仔数从低于11头增加到16头以上时，平均出生体重从1.59 kg降低到1.26 kg。本研究也可见此类情况，PRV野毒gE抗体阴性母猪产总仔数、活仔数均高于gE抗体阳性母猪，但gE抗体阴性母猪所产弱仔较野毒阳性母猪每胎次多0.36头，主要原因为gE抗体阴性母猪产仔数高于gE抗体阳性母猪，导致个体均重下降，不达标弱仔数增多。且本研究中每头母猪所产窝重基本相似，而gE抗体阳性母猪每胎次胎儿数(12.81)少于gE抗体阴性母猪提供的数量(13.33)，所以胎儿在母猪体内发育相对较好，个体重较大。
本研究中，PRV野毒gE抗体阴性母猪断奶活仔率为82.43%，极显著低于gE抗体阳性母猪的85.39%(P＜0.001)，主要原因为gE抗体阴性母猪所产仔猪个体均重较低，且活仔数较多，导致母猪压死仔猪的概率提高，并且母猪所能提供的乳汁量整体水平相似，不能喂养过多的仔猪，这可能也是导致gE抗体阴性母猪所产仔猪在产房阶段死亡率高于阳性母猪的一个很重要原因。相似的，有研究报道显示，母猪压死仔猪或母猪乳汁不足导致的仔猪死亡率随着产仔数的增加而升高，尤其是弱仔的死亡率升高[18-21]。
母猪一般在3~6胎繁殖性能最佳时其产仔初生重相对较高，一胎母猪所产仔猪初生重较低[15, 22]，Zeng等[15]研究表明，仔猪初生重小于1 kg的仔猪比体重大于1 kg或更大的仔猪断奶前死亡的风险更高，Hong等[23]研究表明，母猪的哺乳行为和仔猪的出生体重密切相关，体重偏小的仔猪死亡率也会相应升高。由于本研究主要针对初产母猪产仔情况调查，活仔个体均重相对偏低，所以这是本研究中总体仔猪断奶存活率较低，仅为83.25%的主要原因。
结果可见，PRV野毒gE抗体阳性母猪所产仔猪的断奶活仔率和平均断奶重极显著高于gE抗体阴性母猪所产仔猪(P＜0.001)，主要原因为gE抗体阴性母猪所产仔猪初生重较低导致，有研究显示，初生重越大断奶重则越大，且断奶成活率越高[16, 24-26]，但发现gE抗体阴性母猪的断奶仔猪合格率极显著高于gE抗体阳性母猪(P＜0.001)，这说明gE抗体阴性母猪所产仔猪均一度好，个体差异较小，整齐度较高，便于后期猪只饲养和批次生产管理，并可减少与外界环境接触次数，降低非洲猪瘟和其他疾病的感染风险[27-28]。
我国现阶段猪场疫病较复杂，猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)一般认为是目前危害我国养猪业母猪繁殖障碍的主要因素，但本研究调查猪场种猪免疫了蓝耳病灭活疫苗，且在调查过程中采集了母猪血液及部分死胎，检测PRRSV，结果显示阴性，可见，本场生产成绩变化主要为前期感染伪狂犬病导致。PRV野毒gE抗体阴性母猪每胎次可为猪场多带来0.28头断奶合格仔猪，且断奶整齐度更高，这可为猪场带来更多的经济效益。且净化后的品牌效应等也可间接带来更高的收益。何启盖等[29]对不同综合试验站调查发现，伪狂犬病净化后可使猪只全程成活率提高至94.8%、母猪配种分娩率提高至92.4%、窝产活仔数提高到11.21头。缪余洲等[30]研究表明，同等情况下的600头伪狂犬病净化试验猪比600头伪狂犬病未净化对照组的母猪第4年收益率高39.01%。伪狂犬病的净化产生的利润可随着时间的推移以及农场规模的扩大而增加，并且养殖场越早净化伪狂犬病，带来的经济利益就越大，1个平均存栏1.45万头的伪狂犬病净化猪场平均每年比未净化猪场多收益802万元[31]。并且，伪狂犬病带毒猪潜伏感染被激活后，再度暴发伪狂犬病，将给企业带来更大的损失，所以伪狂犬病的净化势在必行。
4 结论PRV野毒gE抗体阴性母猪每胎次较gE抗体阳性母猪平均多提供0.63头活仔、0.28头断奶合格仔猪，并且断奶合格仔猪整齐度更高，可为猪场带来更大的直接经济效益。PRV野毒感染降低了母猪的生产成绩。在种猪场应积极开展伪狂犬病的净化工作。
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