肝簇虫病(hepatozoonosis)是由顶复门(Apicomplexa)、真球虫目(Eucoccidiorida)、肝簇虫属(Hepatozoon)的原虫寄生于动物血液、内脏器官所引起的疾病^[1-3]。肝簇虫属超过340个种，可感染两栖类、爬行类、鸟类和哺乳类，见于哺乳动物的约有50个种^[4-5]。

肝簇虫病主要通过吸血昆虫(蜱)传播，患病动物出现精神沉郁、厌食、消瘦、贫血及共济失调等症状。目前尚无特效治疗药物^[6]，仅能通过阿莫西林、环孢霉素、克林霉素及多西环素等抗菌药物配合糖皮质激素类、阿司匹林对症处理缓解症状^[7-9]。

1 病原

目前报道危害犬科动物的虫种为犬肝簇虫(H. canis)及美洲肝簇虫(H. americanum)；猫科动物可感染猫肝簇虫(H. felis)、野猫肝簇虫(H. silvestris)及犬肝簇虫(H. canis)^{[1, 4-5, 10]}。

H. canis及H. felis主要分布于欧洲、非洲、美洲及亚洲^[11-33]；H. americanum则主要分布于美洲^{[1, 17, 34-36]}；H. silvestris仅见于巴尔干半岛^[4]。在我国目前仅在犬体内发现H. canis^[37]。

1.1 病原形态 1.1.1 犬肝簇虫(H. canis)

主要侵害中性粒细胞，虫血症水平一般较高。成熟配子体(gamont)长为5~7 μm，宽3~5 μm，呈胶囊样，寄生于中性粒细胞的细胞质，占据较大的空间，将细胞核挤至一侧或将其掩盖^[38](图 1)。

1.1.2 美洲肝簇虫(H.americanum)

成熟配子体呈胶囊样，长约为8 μm，宽约为4 μm。该虫主要侵害单核细胞，寄生于细胞质中，有时被细胞核掩盖(图 2)。

1.1.3 猫肝簇虫(H. felis)

配子体呈长椭圆形，长约为10 μm，中央有核；一般出现于中性粒细胞及单核细胞的细胞质中，将细胞中的分叶核挤至细胞一侧，具膜包被(图 3)。

1.1.4 野猫肝簇虫(H.silvestirs)

配子体在形态和遗传特点上与H.felis相差较大；配子体呈香蕉样，较细长，并且两端弯曲；长约为12 μm，宽约为5.5 μm^[4](图 4)。

1.2 生物学

肝簇虫的生活史在传播媒介(蜱类)和脊椎动物体内完成；脊椎动物摄食带虫蜱类或者捕食带虫动物而感染^{[1, 7, 39]}；从犬科和猫科动物食入感染性卵囊到发育为成熟配子体一般需要28 d^[40]。

感染性卵囊经胃酸、胆汁作用后破裂，子孢子(sporozoite)逸出^[38]，经循环系统到达骨髓、脾、肺、肾、淋巴结等处寄生，并进行裂殖生殖^{[8, 11]}。配子体被吸入蜱血腔后发育成熟，并发生配子生殖形成合子(zygote)，合子经孢子生殖发育成为感染性卵囊^[38]。

犬肝簇虫的传播媒介为血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)^[41]，除南极洲外，该蜱在各大洲均有分布^[42-43]。美洲肝簇虫的传播媒介为斑点钝眼蜱(Amblyomma maculatum)^[44-45]，主要分布于美国北部、墨西哥湾沿岸及大西洋沿岸^[46]。传播途径主要为水平传播；此外H. canis还可通过胎盘发生垂直传播^{[11, 47]}。

2 致病性 2.1 临床症状 2.1.1 犬肝簇虫(H.canis)

感染动物一般呈亚临床症状^[48]；病情发展过程中临床症状不典型，只有在发生继发感染或混合感染后，动物才表现出不适^[49]，如与弓形虫、巴贝斯虫、细小病毒等病原混合感染、抵抗力下降之后，犬才开始表现症状^{[32, 50]}。

动物一般表现为厌食、消瘦、精神不振，偶有呕吐和腹泻等胃肠道症状；有时步履不稳，步态异常；眼部出现大量黏性分泌物^[51]；体重减轻、黏膜苍白、触诊有疼痛反应^[52]，偶有皮下出血、牙龈出血和腹部紫癜^[7]；当感染严重时机体发热，裂殖体侵害脏器时，相应功能遭到破坏：如侵害肾时，犬出现多尿及烦渴^[53]。

2.1.2 美洲肝簇虫(H. americanum)

该虫种致病力强，损伤大，临床症状明显^{[49, 54-55]}。临床表现通常有发热、肢体僵硬、食欲减退、精神不振甚至昏睡；被毛粗乱无光^[55]；步态异常和眼部分泌物及黏液增多是经常出现且非常明显的两大特征^[8]。由于其肌肉、骨骼损伤所带来的疼痛，使得病犬不愿活动；随着活动量和食量的减少，肌肉也会发生萎缩^[55]。

2.1.3 猫肝簇虫(H. felis)

该虫种是猫肝簇虫病的主要病原。猫肝簇虫病与犬肝簇虫病的临床症状相似，消化道症状如厌食、呕吐、腹泻；贫血、黏膜黄染；眼部分泌物增多，并伴有间歇性的发热^[56]；偶有跛行、共济失调^[31]。

2.2 病理变化 2.2.1 犬肝簇虫(H.canis)

该虫主要寄生于血液中的中性粒细胞、内脏器官及骨髓^[57]。可出现血小板减少、贫血，血清肌酸激酶(CK)、碱性磷酸酶(ALP)浓度增高^{[8, 31, 58-59]}。嗜中性粒细胞的数量随着寄生虫血症水平波动^[57]；一般虫血症水平在1%~5%，但在某些特殊病例中，虫血症水平甚至可以达到70%^{[23, 49, 60]}。

随着病情的发展，裂殖体寄生于内脏及骨髓，引起器官炎症、发生骨髓炎，影响机体的造血功能^{[7, 31]}；这可能也是造成犬黏膜苍白、皮下出血的原因。

骨组织经HE染色后可见裂殖体形成“轮辐”结构；此结构可以作为诊断犬肝簇虫病的标志之一^[60](图 5)。

与H. americanum和H. felis不同，H. canis还有可能进一步发展出现皮肤症状^[1]：患处肿胀增生，表现瘙痒、脱毛，并伴随明显的波动感。

2.2.2 美洲肝簇虫(H. americanum)

虽然在单核细胞中寄生，但虫血症水平不高，一般只有0.5%。该虫通常引起白细胞数量持续性增多^[39]，血清中碱性磷酸酶含量升高，并伴有血清蛋白及白蛋白总数的下降，并发机体水肿，水肿部位主要集中于腹部，犬腹围增大、呼吸困难。

剖检后可见其淋巴结、脾等免疫器官轻微肿大。在组织器官的损伤当中，肌肉及骨的损伤最为明显：骨膜通常有明显的增生，骨的结构被破坏^{[1, 55]}；横纹肌有环状结构囊肿^[38]；由此引起犬出现步态僵硬、共济失调^[61]。

H. americanum在肌肉的寄生数量较多，在肌肉切片镜检中能够发现H. americanum特征性的“洋葱皮”样囊肿(图 6)：大小在65 μm×55 μm左右，裂殖体在肌肉纤维中寄生，不断侵害周围组织，因此肌肉组织发生炎症反应，产生大量的黏多糖，在细胞周围层层包裹。这种特征性的病理变化可以作为诊断依据^{[45, 62-63]}。

犬摄入感染了肝簇虫的蜱虫5周后就有可能检查出骨的病理变化^[64]，X光成像可见骨膜增生非常严重^[49]；可见其腿骨骨膜及周围软组织发生增厚和水肿，出现淤血点；在骨的横断面可见其中有偏离中心或者呈环状聚集形成的空斑；骨皮质的周围有厚度不一的骨松质沉着^[54]；骨质损伤主要集中于四肢近端骨，而病变最严重的一般是股骨及肱骨，对远端骨的破坏相对较少；扁骨的损伤情况最轻微^{[54, 65]}。

骨磨片镜检可发现骨膜深层发生肿胀，梭形的细胞核肿胀，逐渐变化成为星形，细胞活动活跃。细胞转变为多层排列并不断增生，附着在皮质骨表面^[54]。

2.2.3 猫肝簇虫(H.felis)

猫肝簇虫病血液生化检查可见嗜中性粒细胞数量上升，血清蛋白含量减少，并伴随着血小板含量的下降^[15]；有可能发生黄疸，可能是由于其红细胞被破坏或肝细胞发生损伤^[56]。血清肌酸激酶、碱性磷酸酶浓度增高可能是由于骨骼肌或心肌裂殖体的寄生所致^{[15, 31]}。

肌肉切片镜检可见裂殖体形成的包囊；一般呈椭圆形或圆形，大小在64 μm ×75 μm到98 μm×122 μm之间，嗜酸性核被黏多糖物质包裹，周围结缔组织中有巨噬细胞浸润^[66](图 7)，其中裂殖体(schizont)一般为40 μm×35 μm大小^[5]。

3 诊断

对肝簇虫的检测主要有病原学检测、分子检测、免疫学检测三种方法。免疫学检测主要是间接ELISA方法^[67]。

3.1 病原学检测

肝簇虫病的病原学检测手段主要集中于血涂片及肌肉切片镜检两种方式^{[1, 5, 7, 32, 38-39, 41, 45, 54-55, 62]}。

H. canis主要侵害中性粒细胞，配子体在其中寄生，这是它主要的病理变化之一，可以作为诊断依据。H. americanum及H. felis虫血症水平不高，血涂片镜检效率较低，不能作为一种可信的检测手段。

H. canis可以通过骨组织形成的“轮辐”结构确诊；H. americanum及H. felis可以通过肌肉组织内的“洋葱皮”样囊肿确诊。

3.2 分子检测

PCR技术是现有应用最广、可用来确诊肝簇虫病的方法之一^{[5, 19, 25, 30-31, 34, 43, 68]}。

检测主要针对虫体的18S rRNA基因，而提取DNA的样品有全血、棕黄层及骨髓，都可作为样品的来源，其中棕黄层和全血用作PCR样品的灵敏度、准确性最高^[68]。

4 结语

肝簇虫不仅影响动物的健康及正常活动，而且感染严重时可造成动物死亡。目前我国仅报道家犬感染犬肝簇虫，而对其他犬科、猫科动物的感染情况尚缺乏研究。认识该病的危害，加强我国犬科、猫科动物肝簇虫的检测与防控，将有助于动物的关爱及保护工作。