葵花盘(Sunflower plate)为除葵花子后向日葵盘，2006版《中药大辞典》载：向日葵花盘，药性甘、寒，归肝经，功用清热平肝，止痛止血；主治头痛头晕、耳鸣、痛经、高血压病、子宫出血、疮疹^[1-3]。痛风，是一种由于长期的嘌呤代谢障碍及血尿酸(uric acid, UA)增高等原因所引起的、以组织损伤为特点的异质性疾病，其临床表现为血尿酸盐男性高于420 μmol·L^-1、女性高于360 μmol·L^-1的高尿酸血症^[4]。目前为止西药尚未发现根治痛风的有效药物，临床上用于治疗高尿酸血症的药物主要有减少血UA生成的药物如别嘌呤醇和Fexbuxostat等，但不良反应较多，如引起过敏、肝肾损伤、骨髓抑制、胃肠道反应、关节痛和皮疹等，在一定程度上限制了临床应用^[5-9]。葵花盘粉是一种新型抗痛风成分，但其对痛风的治疗作用国内外少见报道，本研究探讨葵花盘粉对高尿酸血症小鼠血UA水平以及相关炎症因子活性的影响，阐明中药葵花盘粉对痛风的防治作用，旨在为新型抗痛风药物的研究提供实验依据。

SPF级昆明雄鼠96只，体质量(25±5)g(辽宁长生生物技术有限公司)，动物许可证号：SCXK(辽)2015-0001。雄性SD大鼠36只，体质量(200±50) g (辽宁长生生物技术有限公司)，动物许可证号：SCXK(辽)2015-0001。葵花盘粉(吉林金塔集团股份有限公司，颗粒状)，酵母膏(英国Oxiod公司)，别嘌醇片[世贸天阶制药(江苏)有限责任公司]，尿酸钠(美国Sigma公司)，秋水仙碱(吉林省华侨药业有限公司)。UA检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)，白细胞介素10(interleukin-10, IL-10)和巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory protein-1α, MIP-1α)ELISA试剂盒(美国R&D公司)。酶标仪ELX800(美国伯腾仪器有限公司)。

葵花盘粉主要成分包括小分子肽、生物碱、总黄酮和多糖等，各组分提取参照文献[1-2]。

研究进行前对小鼠进行称质量，其中12只作为空白对照组，其余小鼠用于制备高尿酸血症模型。实验期间每日早间称质量。模型建立采取酵母膏灌胃的方法，通过给予大量嘌呤物质使其小鼠血UA值升高，嘌呤代谢紊乱，从而达到短时间内暂时性升高血小鼠血UA水平的效果。建模成功的小鼠分为模型组、阳性对照(别嘌醇)组、小分子肽组、生物碱组、总黄酮组、多糖组和葵花盘粉组，共7组，每组12只。造模期间，除空白对照组(等体积水灌胃)外，其他各组小鼠每天按20g·kg^-1酵母膏进行灌胃，1次·d^-1, 连续灌胃7d，第7天夜间断食，次日清晨取血测血UA水平。第9天开始，空白对照组小鼠每日等体积水灌胃，根据血UA水平测试结果随机选取12只作为模型组，余下均分为6组给药，上午持续酵母膏灌胃，给药组下午灌胃给药(0.25mL·d^-1)，连续给药7d，7d后晚间断食，次日清晨取血测血UA水平。

在雄性SD大鼠膝关节腔注射3mg微晶型尿酸钠(MSU)，建立大鼠急性痛风性关节炎模型^[10-12]。实验分为空白组、模型组、阳性对照药秋水仙碱组(0.3 mg·kg^-1剂量)、不同浓度(0%、20%、40%、60%、80%和100%)乙醇葵花盘提取物(SDE)组。分别测定0、12、24和48 h时大鼠关节周长，以此判定大鼠关节肿胀度。

各组小鼠取血前一晚断食，次日空腹取血, 静置并分离血清和UA检测试剂盒和酶比色法，于96孔板加样测定样本血UA水平。检测结果以模型组小鼠血UA水平大于空白组确认为造模成功。

分别取各组小鼠新鲜肝和肾组织，进行组织切片及HE染色，并于显微镜下观察肝和肾组织形态表现。

采用踝关节注射MSU混悬液法建立急性痛风性关节炎大鼠模型。检测基线期及造模后不同时间点12、24和48 h时踝关节直径，以造模后与基线期踝关节直径差值作为关节肿胀度的衡量标准。实验结束后，大鼠腹主动脉采血。采用ELISA试剂盒检测血清中IL-10和MIP-1α水平。

采用GraphPad Prism 5统计软件进行统计学分析。各组小鼠体质量、小鼠血UA水平、大鼠关节肿胀度和大鼠血清中IL-10和MIP-1α水平均以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析。以P < 0.05表示差异有统计学意义。

与空白对照组比较，造模后各组小鼠体质量正常增长；与给药前比较，给药后模型组(35.77 g±1.04 g)小鼠体质量变化逐渐减少；各给药组小鼠给药后体质量均呈小幅度增长趋势，但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表 1。

与模型组比较，别嘌醇组、葵花盘粉组、小分子肽组、生物碱组和总黄酮组小鼠给药后血UA水平明显降低(P < 0.05)。其中阳性对照药物别嘌醇组小鼠血UA水平降低效果最为明显，其次是小分子肽组、葵花盘粉组、总黄酮组及生物碱组。见表 2。

空白对照组小鼠肾小球正常，肾小管上皮细胞饱满、排列整齐，未见肾小管扩张，管腔清晰，无炎症及纤维化。模型组小鼠肾小球数目未见差异，肾小管管腔扩张，上皮细胞空化、萎缩、坏死，可见炎细胞浸润，管腔可见蛋白管型和细胞管型。小分子肽组小鼠肾组织染色结果与空白对照组比较无明显差异。多糖、生物碱和总黄酮组小鼠肾小球未见异常，肾小管管腔略扩张，少见蛋白管型。葵花盘粉组小鼠肾组织染色结果与空白对照组比较无明显差异。别嘌醇组小鼠可见肾皮质炎细胞浸润、明显肾小管管腔扩张，肾小管上皮细胞空化。见图 1(插页六)。

A:Blank group; B:Model group; C:Small molecule peptides group; D:Alkaloids group; E:Total flavonoids group; F:Polysaccharide group; G:Sunflower plate powder group; H:Allopurinol group. 图 1 各组小鼠肾脏组织形态表现(HE，×400) Figure 1 Morphology of kidney tissue of mice in various groups(HE, ×400)

图选项

空白对照组小鼠肝组织肝小叶内肝细胞及肝细胞索清晰，肝细胞胞质饱满。模型组小鼠肝组织部分肝小叶内肝细胞及肝细胞索不清晰，肝细胞萎缩可见点状坏死灶及肝细胞嗜酸性变。小分子肽组小鼠肝组织肝小叶内肝细胞及肝细胞索清晰，肝细胞胞质饱满，偶见点状坏死灶。生物碱组、总黄酮组和多糖组小鼠肝组织偶见点状坏死灶及嗜酸性变。葵花盘粉组小鼠肝组织肝小叶内肝细胞及肝细胞索清晰，肝细胞胞质饱满，偶见点状坏死灶。别嘌醇组小鼠肝组织部分肝小叶内肝细胞及肝细胞索不清晰，肝细胞萎缩多见散在炎细胞浸润灶、点状坏死灶及偶见中央静脉周围的肝细胞空化淡染。见图 2(插页六)。

A:Blank group; B:Model group; C:Small molecule peptides group; D:Alkaloids group; E:Total flavonoids group; F:Polysaccharide group; G:Sunflower plate powder group; H:Allopurinol group. 图 2 各组小鼠肝脏组织形态表现(HE，×200) Figure 2 Morphology of liver tissue of mice in various groups(HE, ×200)

图选项

与空白组比较，模型组大鼠右膝关节肿胀度均明显增加(P < 0.01)，说明注射MSU能够成功建立大鼠急性痛风性关节炎模型，且建成的动物模型比较稳定，阳性对照药秋水仙碱组大鼠关节肿胀未见明显好转。与模型组比较，在12 h时，0%和20% SDE组大鼠右膝关节肿胀减轻(P < 0.05)，40%和60% SDE组大鼠右膝关节肿胀明显减轻(P < 0.01)；在48 h时，0%和20% SDE组大鼠关节肿胀明显减轻(P < 0.05)。见图 3。

*P < 0.01 vs blank group; △P < 0.05, △△P < 0.01 vs model group. 图 3 各组大鼠关节肿胀度 Figure 3 Degrees of joint swelling of rats in various groups

图选项

与模型组比较，阳性对照药秋水仙碱组大鼠血清IL-10水平升高(P < 0.01)；与模型组比较，20%SDE组大鼠血清IL-10水平明显升高(P < 0.01)；与模型组比较，20%SDE组大鼠血清中MIP-1α水平明显升高(P < 0.01)。见图 4。

*P < 0.01 vs blank group; △P < 0.01 vs model group. 图 4 各组大鼠血清中IL-10(A)和MIP-1α(B)水平 Figure 4 Levels of serum of IL-10(A) and MIP-1α(B)of rats in various groups

图选项

近年来，高尿酸血症已经成为威胁人类健康的代谢性疾病之一, 其与高血压、糖尿病、冠心病和慢性肾脏疾病等密切相关, 研究^[13]显示：高尿酸血症也是上述疾病的独立危险因素, 可使病情进展迅速, 病死率明显增加；其直接毒性、继发炎症反应等可导致多种器官系统损害^[14]。目前高尿酸血症治疗仍以药物治疗为主，尽可能选用对肝肾组织损害小的成分。本研究利用酵母膏灌胃方法^[15-16]建立高尿酸血症模型，此方法简便易操作，并且至少可维持2周。造模成功后各给药组连续给药7d，结果显示：别嘌醇组、葵花盘粉组、小分子肽组、生物碱组和总黄酮组小鼠血UA降低，且结果具有明显差异，而阳性药物别嘌醇组虽能降低血UA水平，但长期应用对肾脏细胞有很大的损伤。为进一步探讨该药物对痛风及其肝肾损伤所致并发症的防治作用，本研究采用HE染色观察小鼠肝和肾组织形态表现，显微结构提示葵花盘粉及其主要成分对受损的肝肾细胞具有一定的抗炎和修复作用，其中效果最好的是小分子肽组。本研究在雄性SD大鼠膝关节腔注射3mgMSU，建立大鼠急性痛风性关节炎模型^[17-18]，相关炎症因子IL-10和MIP-1α水平测定结果显示：葵花盘粉同时具有提高机体抗炎活性和降低机体炎症反应的作用。因此，葵花盘粉对痛风及其并发症患者肝肾组织保护作用机制需要进行进一步动物实验及细胞水平实验验证。

综上所述，葵花盘粉降低血UA水平同时降低机体炎症反应，其主要成分小分子肽对痛风及高尿酸血症的治疗具有标本兼治的功效，且可以避免长期服用西药抗痛风类药物对肝和肾组织造成的损伤^[19-20]，但该药物具体的抗痛风作用机制有待进一步研究。