吉林大学学报(医学版)  2017, Vol. 43 Issue (01): 96-100

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魏雁虹, 宋帅, 耿辉, 刁斌斌, 杨广民
WEI Yanhong, SONG Shuai, GENG Hui, DIAO Binbin, YANG Guangmin
慢性乙型肝炎患者血清α1微球蛋白检测的临床意义
Clinical significance of detection of alpha 1-microglobulin in serum of patients with chronic hepatitis B
吉林大学学报(医学版), 2017, 43(01): 96-100
Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2017, 43(01): 96-100
10.13481/j.1671-587x.20170119

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收稿日期: 2016-04-21
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魏雁虹, 宋帅, 耿辉, 刁斌斌, 杨广民. 慢性乙型肝炎患者血清α1微球蛋白检测的临床意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(01): 96-100.
WEI Yanhong, SONG Shuai, GENG Hui, DIAO Binbin, YANG Guangmin. Clinical significance of detection of alpha 1-microglobulin in serum of patients with chronic hepatitis B[J]. Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2017, 43(01): 96-100.
慢性乙型肝炎患者血清α1微球蛋白检测的临床意义
魏雁虹, 宋帅, 耿辉, 刁斌斌, 杨广民     
吉林省人民医院检验科, 吉林 长春 130021
收稿日期: 2016-04-21
基金项目: 吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题（20130102085JC）；吉林省卫计委科研项目资助课题（2012Z078）
作者简介: 魏雁虹(1975-), 女, 吉林省长春市人, 主管检验师, 医学硕士, 主要从事临床检验诊断学方面的研究。
通信作者: 杨广民, 教授, 硕士研究生导师(Tel:0431-85595353, E-mail:jlygm@163.com)
[摘要]: 目的: 检测不同肝功能损伤情况下慢性乙型肝炎（CHB）患者血清α1微球蛋白（α1-MG）的水平，探讨采用α1-MG评价CHB患者肝功能的临床意义。 方法: 243例CHB患者分为肝肾功能正常组（n=94）、肝功能正常肾功能异常组（n=20）、肝功能异常肾功能正常组（n=100）和肝肾功能异常组（n=29），同时选取健康体检者67人作为对照组，测定各组受试者血清α1-MG水平，同时测定谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）等肝功能指标及血清肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）等肾功能指标。采用免疫比浊法检测α1-MG水平，采用紫外-乳酸脱氢酶法检测ALT水平，采用紫外-苹果酸脱氢酶法检测AST水平，采用AMP缓冲液法检测ALP水平，采用肌氨酸氧化酶法检测CREA水平，采用紫外-谷氨酸脱氢酶法检测BUN水平。 结果: 与对照组比较，肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG水平明显降低（P < 0.05），肝肾功能正常组和肝肾功能异常组患者血清α1-MG水平无明显变化（P>0.05），肝功能正常肾功能异常组患者血清α1-MG水平明显升高（P < 0.01）。按照α1-MG < 10 mg·L-1为判断肝功能异常的标准，肝功能异常肾功能正常组患者血清ɑ1-MG阳性率为36%，肝肾功能异常组患者血清α1-MG阳性率为24%；如以α1-MG < 15 mg·L-1为标准，则肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG阳性率为68%。肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG水平与肝功能指标ALT、AST和ALP呈负相关关系（r=-0.934，r=-0.916，r=-0.847，P < 0.01），且其数值随着肝损伤程度的加重而降低。 结论: α1-MG检测在判断CHB患者肝功能方面具有一定的临床意义，但须排除肾功能损害引起的结果干扰。
关键词： ɑ1微球蛋白     肝炎, 乙型     血清学检测     肝功能     肾功能    
Clinical significance of detection of alpha 1-microglobulin in serum of patients with chronic hepatitis B
WEI Yanhong, SONG Shuai, GENG Hui, DIAO Binbin, YANG Guangmin     
Department of Clinical Laboratory, Jilin Province People's Hospital, Changchun 130021, China
[Abstract]: Objective: To explore clinical significance of alpha 1 microglobulin (α1-MG) in the evaluation on liver function in the patients with chronic hepatitis B (CHB) through detecting the serum levels of α1-MG in the CHB patients with different liver function injuries. Methods: Total 243 CHB patients were divided into normal liver and renal function group (n=94), normal liver function and abnormal renal function group (n=20), abnormal liver function and normal renal function group (n=100), abnormal liver and renal function group (n=29), while 67 cases of healthy persons were selected as control group.The serum α1-MG levels of the subjects in various groups were measured by immune turbidimetry; the liver function indexes such as alanine aminotransferase (ALT), aspartate transaminase (AST), alkaline phosphatase (ALP), and the renal function indexes such as creatinine (CREA), blood urea nitrogen (BUN) were determinedby ultraviolet lactate dehydrogenase method, UV-malate dehydrogenase method, AMP buffer method, sarcosine oxidase method, and UV-glutamic acid dehydrogenase method. Results: Compared with control group, the level of α1-MG in serum of the patients in abnormal liver function and nomal renal function group was significantly decreased (P < 0.05), the serum α1-MG levels of the patients in normal liver function and renal function group and abnormal liver and renal function group had no significant changes (P>0.05), and the serum α1-MG level of the patients in normal liver function and abnormal renal function group was significantly increased (P < 0.01).According to α1-MG < 10 mg·L-1 as the standard for judging abnormal liver function, the positive rate of α1-MG in the patients in abnormal liver function and normal renal function group was 36% and the positive rate in abnormal liver and renal function group was 24%.As to α1-MG < 15 mg·L-1 as the standard, the positive rate of α1-MG in abnormal liver function and normal renal function group was 68%.The serum α1-MG level had negatively correlated with the ALT, AST and ALP of the patients in abnormal liver function and nomal renal function group (r=-0.934, r=-0.916, r=-0.847, P < 0.01), and its values were decreased with the severity of liver injury. Conclusion: α1-MG detection has certain clinical significance in judging liver function in the patients with CHB, but it is necessary to exclude the interference caused by renal damage.
Key words: alpha 1-microglobulin     hepatitis B     serological detection     liver function     renal function    

α1微球蛋白(alpha 1-microglobulin，α1-MG)是相对分子质量为26 000~33 000的小分子糖蛋白，在体内分布广泛，主要由肝细胞特异性合成后，随血液运输分配到体内各种组织中，具有重要的生理作用。我国约有9 300万乙型肝炎病毒(hepatitis B, HBV)感染者，其中慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者约2000万[1-2]。病毒对肝细胞造成长期慢性损害，如得不到及时诊断及治疗，会逐渐发展为肝硬化甚至肝癌。α1-MG用于肾功能检测已有报道[3-4]，并受到广大临床医生的广泛关注，当肾功能损害时，血清和尿液中α1-MG水平可升高[5-7]。近年来，有一些关于α1-MG在诊断胎膜早破和预防先兆流产方面的研究[8-9]，也有研究者将其作为高血压患者的炎性标志物[10]，而在其与肝病的关系方面，国内外仅有少数学者报道了肝病患者血清α1-MG水平可降低[11-12]，认为可能与肝细胞的损害或坏死而导致肝脏合成功能下降有关。但到目前为止，α1-MG在临床上基本被作为反映肾功能的指标，很少用来判断肝功能。本研究检测了不同肝功能损伤情况下CHB患者血清α1-MG的水平，旨在探讨α1-MG在评价CHB患者肝功能方面的临床意义。

1 资料与方法 1.1 对象选择

选择2012-2015年吉林省人民医院收治的243例CHB患者，男性135例，女性108例，年龄18~80岁。其中HBV免疫学指标检测大三阳者87例，小三阳者156例，所有患者病程均超过半年或发病日期不明确而临床有慢性肝炎表现，符合中国肝炎防治基金会、中华医学会肝病学分会和感染病学分会联合发布的中国《慢性乙型肝炎防治指南》(2015年版)的诊断标准。正常对照组选自体检中心的健康体检者67人。本研究所有相关实验室检查均于患者入院12h内完成，并剔除甲型、丙型和戊型肝炎患者。

1.2 分组方法

根据肝肾功能指标，将CHB患者分为肝肾功能正常组[liver (-) renal (-)]94例、肝功能正常肾功能异常组[liver (-) renal (+)]20例、肝功能异常肾功能正常组[liver (+) renal (-)]100例和肝肾功能异常组[liver (+) renal (+)]29例。肝功能异常的标准为血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)或碱性磷酸酶(ALP)中至少一项异常；肾功能异常的标准为血清肌酐(CREA)或尿素氮(BUN)中至少一项异常。同时，对肝功能异常肾功能正常组患者按照肝功能指标及临床表现分为轻、中、重度肝损伤组。根据HBV DNA复制情况不同将94例肝肾功能正常的乙型肝炎患者分为HBV DNA低载量组(HBV DNA载量＜1×103)及HBV DNA高载量组(HBV DNA载量＞1×103)。

1.3 主要试剂和仪器

α1-MG检测试剂购自英科新创(厦门)科技有限公司，HBV-DNA定量检测试剂盒和标准品均购自上海科华公司。奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪购自日本OLYMPUS公司。

1.4 检测方法

所有患者于入院后6 h以内采集静脉血5 mL，离心后吸取上清，分装备检。采用免疫比浊法检测α1-MG水平，采用紫外-乳酸脱氢酶法检测ALT水平，采用紫外-苹果酸脱氢酶法检测AST水平，采用AMP缓冲液法检测ALP水平，采用肌氨酸氧化酶法检测CREA水平，采用紫外-谷氨酸脱氢酶法检测BUN水平，采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量，所有操作均严格按照试剂盒说明书进行。

1.5 统计学分析

采用SPSS19.0软件进行统计学分析。各组患者年龄和血清α1-MG、ALT、AST及ALP水平均以x±s 表示，2组间样本均数比较采用t检验，多组间样本均数比较采用单因素方差分析。α1-MG与肝功能指标的相关性采用Spearman相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 不同临床特征CHB患者血清α1-MG水平

各组患者性别构成及年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较，肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG水平明显降低(P＜0.05)，肝肾功能正常组和肝肾功能异常组患者血清α1-MG水平无明显变化(P>0.05)，肝功能正常肾功能异常组患者血清α1-MG水平明显升高(P＜0.01)。见表 1。

表 1 各组受试者一般资料和血清α1-MG水平 Table 1 General information and levels of serumα1-MG of subjects in various groups
(x±s)
Group n Gender Age (year) α1-MG[ρB/(mg·L-1)]
Male Female
Control 67 32 35 47.2±17.1 20.3±4.6
Liver (-) renal (-) 94 54 40 45.2±13.5 18.8±8.7
Liver (-) renal (+) 20 11 9 51.0±12.5 41.5±30.9**
Liver (+) renal (-) 100 56 44 49.1±14.3 14.8±7.6*
Liver (+) renal (+) 29 14 15 50.0±11.0 23.9±21.1
  * P＜0.05，** P＜0.01 vs control group.
表选项
2.2 各组CHB患者血清α1-MG的阳性率

按照本实验室制订的α1-MG的正常参考值(10~30 mg·L-1)计算血清α1-MG阳性率，即以α1-MG＜10 mg·L-1为判断肝功能异常的标准，肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG阳性率为36%，肝肾功能异常组患者血清α1-MG阳性率为24%。如以α1-MG＜15 mg·L-1为判断肝功能异常的标准，则肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG阳性率为68%，接近于同组患者血清ALT的阳性率(77%)。见表 2。

表 2 各组CHB患者血清α1-MG和其他肝肾功能指标的阳性率 Table 2 Positive rates of serum α1-MG and liver renal funtion indexes in patients with CHB in various groups
[n(η/%)]
Group n α1-MG ALT>40 U·L-1 AST>35 U·L-1 ALP>100 U·L-1 BUN>8.8 mmol·L-1 CREA>81 μmmol·L-1
＜10 mg·L-1 ＜15 mg·L-1
Liver (+) 100 36(36.00) 68 (68.00) 77(77.00) 53(53.00) 40(40.00) 0(0.00) 0(0.00)
  renal (-)
Liver (+) 29 7(24.14) 14 (48.28) 21(72.41) 17(58.62) 13(44.83) 23(79.31) 22(75.86)
  renal (+)
表选项
2.3 血清α1-MG水平与肝功能指标的相关性

按肝功能异常肾功能正常组CHB患者血清α1-MG水平(>20 mg·L-1、15~20 mg·L-1、10~15 mg·L-1和＜10 mg·L-1)分为4组(Ⅰ~Ⅳ组)，与同期血清ALT、AST和ALP值进行相关性分析结果显示：α1-MG与ALT、AST和ALP呈明显负相关关系(r=-0.934，r=-0.916，r=-0.847，P＜0.01)。见表 3。

表 3 肝功能异常肾功能正常组不同血清α1-MG水平CHB患者的肝功能指标 Table 3 Liver function indexes in CHB patients with different serum α1-MG levels in abnormal liver function and normal renal function group
[x±s, λB/(U·L-1)]
Group n ALT AST ALP
Ⅰ 8 56.2±13.5 55.3±11.5 98.7±25.6
Ⅱ 24 97.4±27.7 84.8±21.2 105.7±41.3
Ⅲ 32 125.3±31.4* 117.9±32.7* 121.9±34.9*
Ⅳ 36 156.5±42.3** 129.7±37.4* 119.8±29.4*
  Group Ⅰ:α1-MG>20 mg·L-1; Group Ⅱ:α1-MG 15-20 mg·L-1; GroupⅢ:α1-MG 10-15 mg·L-1; Group Ⅳ:α-MG＜10 mg·L-1; *P＜0.05, ** P＜0.01 vs Group Ⅰ.
表选项
2.4 不同程度肝功能损伤的CHB患者血清α1-MG水平

对肝功能异常肾功能正常组CHB患者按照肝功能指标以及临床表现分为轻、中、重度肝损伤组，观察各组患者血清α1-MG水平, 结果表明：随着肝损伤加重，血清α1-MG水平降低更为明显，重度肝损伤组患者血清α1-MG水平较轻度肝损伤组明显降低(P＜0.05)。见表 4。

表 4 不同程度肝功能损伤CHB患者血清α1-MG水平 Table 4 Levels of serum α1-MG in CHB patients with liver function injuries in different degrees
[x±s, ρB/(mg·L-1)]
Group n α1-MG
Mild hepatic injury 24 16.9±6.7
Moderate hepatic injury 56 14.7±5.9
Severe hepatic injury 20 12.6±3.6*
  * P＜0.05 vs mild hepatic injury group.
表选项
2.5 不同HBV-DNA复制情况下CHB患者血清α1-MG水平

将94例肝肾功能正常的CHB患者按照HBV DNA复制情况分为HBV DNA低载量组和HBV DNA高载量组，排除了肝肾功能损害引起的α1-MG变化，分析不同病毒复制情况下α1-MG的水平，HBV DNA低载量组患者血清α1-MG水平[(18.15±6.3) mg·L-1]与HBV DNA高载量组[(18.15±6.3) mg·L-1]比较差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

本研究共检测了243例CHB患者血清中α1-MG的水平，根据不同临床症状及肝肾功能异常情况进行了对比结果表明：肝肾功能正常的CHB患者血清α1-MG水平略低于对照组，但组间比较差异无统计学意义。α1-MG水平可能与HBV感染无关。为此，本文作者还观察了不同HBV-DNA复制情况下CHB患者血清α1-MG的水平，结果表明：HBV DNA低载量组与HBV DNA高载量组患者血清α1-MG水平比较差异无统计学意义，确证了并非HBV引起α1-MG水平变化。本研究中肝功能正常肾功能异常组患者血清α1-MG水平高于对照组，与其他文献[4, 13]报道一致，即肾功能损害时血清α1-MG水平增高，可能是当肾功能受损时，由于肾小球率过滤增加以及肾小管重吸收功能受损，大量α1-MG由尿中排出，肝脏合成α1-MG代偿性增加，从而导致血清α1-MG水平升高。本研究结果还显示：肝功能异常时，CHB患者血清α1-MG水平因肾功能是否异常而不同；如并发肾功能异常，则α1-MG的水平与对照组比较无明显变化；如肾功能正常，则α1-MG水平明显降低。同时，本研究对α1-MG与肝功能指标进行的相关性分析结果表明：α1-MG水平与ALT、AST和ALP水平呈负相关关系。因此，α1-MG可以做为检测CHB患者肝功能的有效指标。

如果将α1-MG用于评价肝功能受损情况，尚需要通过更多的临床研究制定新的参考标准。参考标准过高或过低均无法客观准确地反映患者实际肝功能情况，以α1-MG正常参考值(10~30mg·L-1)低值为限，即α1-MG＜10 mg·L-1为判断肝功能异常的标准，其阳性率明显低于常规肝功能指标，因此以α1-MG＜10 mg·L-1反映肝功能损伤这一标准有些偏低。本研究选取了正常参考值的低值(10 mg·L-1)以及本研究中正常对照组的均值(20.3 mg·L-1)之间的值(15 mg·L-1)作为临界点，这一数值也接近肝功能异常肾功能正常组患者α1-MG平均值(14.8 mg·L-1)，观察以α1-MG＜15 mg·L-1为判断肝功能异常的标准时的阳性率情况，并与常规肝功能指标进行比较，结果表明：如以α1-MG＜15 mg·L-1为判断肝功能异常的标准，则肝功能异常肾功能正常组患者血清α1-MG的阳性率为68%，大大提高了肝功能异常的阳性检出率且能正确客观反映真实情况。同时本研究结果表明：α1-MG在反映肝功能方面会受到肾功能的影响，如患者肾功能指标异常，α1-MG可能无法客观反映患者肝功能的异常，故临床上应用时须排除肾功能损害引起的结果干扰。

研究[14-16]显示：慢性活动性肝炎患者血清α1-MG水平为(19.8±4.5) mg·L-1，慢性持续性肝炎患者则降低为(13.0±1.4) mg·L-1，肝硬化失代偿期患者为(11.5±5.5) mg·L-1，暴发型肝炎患者为(1.9±0.9) mg·L-1。本研究对轻、中和重度肝损伤患者血清α1-MG水平进行了比较，结果表明：随着肝损伤情况加重，血清α1-MG水平降低更为明显，说明血清α1-MG水平对判断肝脏损害程度和监测病情方面可有一定的帮助。

目前关于α1-MG与肝病关系的研究较少，α1-MG在评价CHB患者肝功能方面尚未得到广泛应用。本研究结果证实：α1-MG检测在判断CHB患者肝功能方面具有一定的临床意义，但其具体机制及评价标准尚需进一步的基础和临床研究。

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