类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种发病机制尚不明确，以多关节滑膜慢性炎症为基本病理改变的自身免疫性疾病，多种细胞因子在炎症过程中起重要作用。胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)是一类白细胞介素7(IL-7)样细胞因子，属于IL-2家族^[1]。研究^[2]表明：TSLP可以增强Th2介导的超敏反应，在过敏性皮炎和哮喘的发病机制中发挥重要作用。然而，近年来国外学者研究^{[3, 4, 5]}

显示：在RA、系统性硬化症和干燥综合征等风湿性疾病中TSLP似乎发挥着一定作用。目前已有国外研究^[6]显示：RA患者关节腔积液中TSLP水平较骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者明显升高，同时抗TSLP中和抗体能够明显改善由抗Ⅱ型胶原抗体诱导的TNF-α依赖的小鼠实验性关节炎损伤。在胶原诱导的小鼠实验性关节炎模型中，给予TSLP注射可明显增加T细胞活化，进而加剧炎症反应，导致关节破坏^[7]，提示TSLP可促进RA炎症进展。但关于TSLP在RA患者外周血中表达水平的研究国内外少有报道。

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythemtosus,SLE)是一种多因素相互作用下，T、B淋巴细胞异常活化产生大量自身抗体，以皮肤黏膜损害，肾脏、血液系统受累，关节炎等多系统损害为特点的慢性自身免疫性疾病。多种细胞因子在炎症和免疫应答过程中起重要作用。近期国外研究^[8]显示：经TSLP转基因处理后的小鼠模型与SLE样慢性移植物抗宿主病相似。但国内外尚无直接的实验证实TSLP与SLE有关联。

本研究检测了RA患者与有关节症状的SLE患者血清中TSLP水平，旨在探究其水平变化与RA和SLE发病机制及疾病活动程度的关系及其临床意义。

选取2015年2—9月在本院住院治疗的40例RA患者作为RA组，均符合2009年欧洲抗风湿病联盟(EULAR)制定的RA分类标准，其中男性8例，女性32例，年龄20~65岁，病程1个月~26年，病情稳定(DAS28-ESR评分＜2.6)4例，低活动度(DAS28-ESR评分为2.6~3.2)2例，中活动度(DAS28-ESR评分3.2~5.1)11例，高活动度(DAS28-ESR评分>5.1)23例。40例RA患者均接受过特定的治疗，如激素、改善病情抗风湿药(DMARDs)或生物制剂等。选取本院同期住院治疗的20例有关节肿痛症状的SLE患者作为SLE组，均符合美国风湿病学会(ACR)2009年制定的SLE分类标准，均为女性，年龄24~68岁，病程2个月~23年，其中病情基本无活动(SLEDAI评分为0~4)12例，轻度活动(SLEDAI评分为5~9)8例。仅有关节疼痛症状6例，其余患者均并发肾脏损害、血液损害、面部皮损或雷诺症状；20例SLE患者均接受过激素和免疫抑制治疗。选取同期健康体检者20人作为正常对照组，其中男性5人，女性15人，年龄23~66岁。纳入对象均排除过敏性皮炎、过敏性鼻炎、哮喘、糖尿病、肿瘤、感染疾病或并发如干燥综合征、克罗恩病等其他自身免疫性疾病。RA组、SLE组和正常对照组研究对象的年龄、性别构成比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

人TSLP酶联免疫检测试剂盒购自美国R＆D公司。酶标仪为瑞士帝肯公司生产的Rain-bow型，低温台式高速离心机(BECKMAN,CATNO368827)，Hamilton牌多道加样枪。

获得研究对象同意后，采清晨空腹静脉血3 mL，3000 r·min^-1离心10 min后取上清，置于EP管中－20℃保存，同批检测。

采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法，标本加入预包被人TSLP单克隆抗体酶标孔中，严格按照试剂盒说明书程序进行操作。于酶标仪450 nm处测吸光度(A)值，绘制标准曲线。根据标准曲线，计算不同A值时TSLP水平。

检测RA患者血常规、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)和抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)抗体水平等，上述实验指标均由本院检验科协助完成，异常判定均参考同期该检查的正常值。同时收集整理患者其他临床资料，如触痛关节数(tender joints count,TJC)、肿胀关节数(swollen joints count,SJC)和视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)，并计算28个关节的疾病活动度(Disease Activity Score in 28 joints)评分，如DAS28-ESR、DAS28-CRP评分。

检测SLE患者血常规、CRP、ESR、尿常规、24h尿蛋白和血清补体水平等，上述实验指标均由本院检验科协助完成，异常判定均参考同期该检查的正常值。同时收集整理患者其他临床资料，如近期是否出现发热、新发胸膜炎、黏膜溃疡、皮疹、脱发、肌炎和脉管炎等临床症状，并计算系统性红斑狼疮疾病活动度指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)。

采用SPSS19.0统计软件进行数据分析。所有分析数据采用Kolmogorov-Smirnov Z正态性进行分析，均符合正态性分布。各组研究对象血清TSLP水平均以x±s表示，组间样本均数比较采用t检验。RA组患者血清TSLP水平与CRP、ESR、抗CCP抗体、TJC、SJC、VAS及DAS28-ESR、DAS28-CRP评分的相关性分析及SLE组患者血清TSLP水平与SLEDAI的相关性分析采用Pearson检验。以α=0.05为检验水准。

RA组患者血清TSLP水平[(54.63±16.30) ng·L^-1]高于正常对照组[(41.69±12.58)ng·L^-1](t=2.73，P=0.013)。但SLE组患者血清TSLP水平[(45.30±17.55)ng·L^-1]与正常对照组比较差异无统计学意义(t=0.673，P>0.05)。

RA患者血清TSLP水平与患者ESR(r=0.550，P<0.0001)、CRP(r=0.504，P=0.001)和抗CCP抗体(r=0.895，P<0.0001)水平呈正相关关系，但与RF(r=0.66，P=0.69)、SJC(r=-0.087，P=0.593)、TJC(r=0.178，P=0.273)、DAS28-ESR(r=0.213，P=0.187)和DAS28-CRP(r=0.170，P=0.293)无相关关系。

SLE患者血清中TSLP水平与SLEDAI无相关性(r=0.079，P=0.749)。

27例抗CCP抗体阳性患者血清TSLP水平[(60.97±17.50)ng·L^-1]高于13例抗CCP抗体阴性患者血清TSLP水平[(40.46±5.27 )ng·L^-1](F=16.91，P<0.0001)。

TSLP是一类IL-7样细胞因子。1994年Friend等^[9]首次于鼠类的胸腺基质细胞系分泌的上清液中发现TSLP，并证实其支持B细胞增殖的生理作用。近年来研究^[10]提示：经TSLP刺激后的树突状细胞(dendritic cells,DCs)能够有效募集CD4⁺ T细胞，产生大量胸腺活化调节趋化因子和巨噬细胞来源的趋化因子，最终导致CD4⁺ T细胞向Th2细胞分化，生成IL-4、IL-5、IL-13和TNF-α等细胞因子。TNF-α在RA病理机制中发挥重要作用^[11]，其融合蛋白抑制剂已广泛应用于中重度RA患者的临床治疗中。已有国外研究^[6]显示：RA患者的关节腔积液中TSLP和TNF-α水平较对照组明显升高。本研究结果显示：RA患者血清中TSLP水平明显高于正常对照组，并与CRP和ESR等炎性指标呈正相关关系，提示TSLP与RA病程进展密切相关。结合已有研究推测：在RA患者外周血中TSLP水平上调，通过募集大量CD4⁺ T细胞向Th2细胞分化，诱导TNF-α等炎症因子释放，最终加重RA患者局部炎症反应。国外文献^[3]报道：接受过DMARDS或生物制剂治疗的患者关节腔积液中TSLP水平较未接受治疗的患者明显降低，从另一方面支持上述推测。本研究未发现TSLP水平与TJC、SJC、VAS评分以及DAS28-ESR、DAS28-CRP评分具有相关性，说明外周血中TSLP水平反映RA病情活动程度有限，仍需进一步扩大样本数后再次证实。

抗CCP抗体是环状聚丝蛋白的多肽片段，以IgG型为主。RA患者B细胞可特异性高表达抗CCP抗体，而其他疾病或正常人群的B细胞不分泌^[12]。近期有国外研究^[13]显示：在前体B细胞白血病与急性粒细胞白血病中TSLPR突变，提示TSLP信号传导通路异常对B细胞的发育成熟有影响。研究^[14]显示：扁桃体隐窝中的上皮细胞可释放B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)，达到刺激B细胞分泌多种活性抗体应对抗原攻击的生理作用。且TSLP可通过诱导DCs产生BAFF增强上述过程 ^[14]。本研究结果显示：RA患者血清TSLP水平与抗CCP抗体明显相关，且抗CCP抗体阳性患者血清TSLP水平明显高于阴性患者，提示TSLP与抗CCP抗体有紧密联系，可能原因：TSLP可上调BAFF分泌，促进B细胞发育成熟并特异性高表达抗CCP抗体，加重患者局部炎症反应、导致骨质破坏。

SLE是以B细胞高度活化、产生大量的致病性自身抗体与免疫复合物而导致组织或器官损害的疾病^[15]。近年来国内外研究^{[16, 17]}显示：Th1/Th2失衡参与了SLE发病，其中大部分学者认为活动期SLE患者外周血Th1细胞降低，Th2细胞升高，即Th2优势。综上所述，TSLP可诱导CD4⁺ T细胞向Th2细胞分化，且能够通过上调BAFF水平活化B细胞。因此，本研究将以关节炎为突出临床表现的SLE患者作为研究对象。但本研究中SLE组和正常对照组研究对象血清中TSLP水平比较差异无统计学意义，表明TSLP与SLE的发生无明显关联。这个结果可能与样本量少有关，还需进一步验证。研究^{[18, 19]}显示：过度表达的TSLP可诱发冷球蛋白症与免疫复合物介导的膜增生性肾小球肾炎，而SLE发病主要与免疫复合物形成有关联。可见TSLP在SLE发病机制中存在一定研究前景，有待深入探讨。

综上所述，TSLP与RA发病过程存在密切联系，可能对抗CCP抗体具有一定的调控作用。外周血TSLP表达水平与CRP和ESR等炎性指标呈正相关关系，在一定程度上反映炎症活动，但能否作为疾病活动程度以及治疗效果的参考检验指标有待进一步探究。而TSLP是否参与SLE发病过程并对病情活动产生影响仍需扩大样本量进一步探究。