2020, Vol. 46扩展功能
文章信息
- 乔良伟, 曲青山, 李明
- QIAO Liangwei, QU Qingshan, LI Ming
- LncRNA-ATB通过调节miR-200c表达对肾移植大鼠急性排斥反应的影响
- Effect of LncRNA-ATB on acute rejection of kidney transplanted rats by regulating miR-200c expression
- 吉林大学学报(医学版), 2020, 46(05): 955-962
- Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2020, 46(05): 955-962
- 10.13481/j.1671-587x.20200510
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文章历史
- 收稿日期: 2020-02-26
肾移植是治疗终末期肾病（end-stage kidney disease，ESRD）的有效手段，排斥反应是肾移植术后的主要难题和并发症，也是影响移植肾长期存活的主要危险因素，目前临床上最常见的排斥反应类型是急性排斥反应（acute rejection，AR）[1]。近年来，随着免疫抑制剂的出现，肾移植后排斥反应发生率不断下降，但仍时有发生。长链非编码RNA（long non-coding RNA，LncRNA）是一类不具有蛋白编码功能的RNA，广泛参与调节机体的各项基础生物进程，其表达水平异常与多种疾病的发生发展存在密切关联[2]。被转化生长因子β活化的长链非编码RNA（long non-coding RNA activated by TGF-β，LncRNA-ATB）是LncRNAs的重要成员，参与细胞增殖、凋亡、转移和侵袭等多种生理过程[3]。既往研究[4]表明：LncRNA-ATB在器官移植免疫排斥反应中起调控作用，但在肾移植方面报道较少。本研究通过沉默肾移植模型大鼠LncRNA-ATB的表达，探讨LncRNA-ATB对肾移植大鼠移植后AR和受体组织炎症反应的影响，分析肾移植AR潜在的分子机制，为临床诊断和治疗AR提供参考。
1 材料与方法 1.1 实验动物、主要试剂和仪器供体：雄性SD大鼠30只，SPF级，7~8周龄，体质量250~300 g；受体：雄性Wistar大鼠40只，SPF级，7~8周龄，体质量230~300 g；均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物生产许可证号：SCXK（京）2016-0001。所有大鼠术前12 h禁食不禁水。含有LncRNA-ATB-短发夹（shRNA）和LncRNA-ATB-NC的psiCHECK2基因重组质粒（上海吉玛公司），Opti-MEM培养基和脂质体2000（Lipofectamine 2000）（美国Invitrogen公司），白细胞介素6（interleukin6，IL-6）、白细胞介素8（interleukin-8，IL-8）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）ELISA试剂盒（美国Abcam公司），兔抗大鼠Toll样受体4（Toll-like receptor-4，TLR4）、髓样细胞分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）和核转录因子κB（nuclear transcription factor κB，NF-κB）多抗及辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔MyD88和NF-κB单抗（英国Abcam公司）。7600全自动生化分析仪（日本Hitachi公司），Cary3500紫外分光光度计（美国安捷伦公司），550型全自动酶标仪和PowerPac系列电泳仪（美国Bio-Rad公司）。
1.2 大鼠肾移植AR模型建立和分组供体和受体大鼠腹腔注射水合氯醛溶液（10%W/V）进行麻醉，固定于手术台上。供体30只SD大鼠经中线切口暴露腹主动脉、左肾及其所属动静脉，结扎肾上腺动静脉，游离左肾及肾动静脉，分离输尿管，用4℃含肝素生理盐水灌注左肾阻断肾脏血液供应，切断左肾静脉，待左肾颜色变为黄白色且左肾静脉流出清亮的灌注液后，切断左肾动脉，取出肾脏保存于4℃含肝素生理盐水中，剪去供肾多余脂肪及腔静脉，以利血管吻合。受体30只Wistar大鼠暴露左肾后移除，将供肾放置左肾窝，左肾静脉采用cuff套管吻合法，动脉采用端端吻合法。吻合完成后打开血管夹，数秒内可见左肾颜色变红，少量尿液从输尿管排出。术后肌肉注射青霉素10万单位，连续3 d。其余10只Wistar大鼠为假手术组，开腹后随即连续全层关闭，其他操作同上。术后所有大鼠均给予正常饮食和饮水。术后将移植成功的27只大鼠（死亡3只）随机分为模型组、LncRNA-ATB-shRNA组和LncRNA-ATB-NC组，每组9只。
1.3 干预方法制备质粒脂质体复合物：按照Lipofectamine 2000转染试剂盒说明书，将5 μg含有LncRNA-ATB-shRNA（或LncRNA-ATB-NC）的psiCHECK2基因重组质粒、10 μL Lipofectamine 2000分别用Opti-MEM培养基稀释至总体积各为30 μL，室温静置5 min，然后将2种液体混合均匀，室温放置30 min，获得质粒脂质体复合物备用。肾移植术后2 h分别将2种质粒脂质体复合物用Opti-MEM培养基稀释至总体积200 μL，经尾静脉分别快速注入LncRNA-ATB-shRNA组和LncRNA-ATB-NC组大鼠体内。假手术组和模型组大鼠按每只200 μL尾静脉注射Opti-MEM培养基。
1.4 RT-PCR法检测大鼠外周血中LncRNA-ATB、微小RNA（microRNA，miRNA）-200c表达水平各组大鼠干预7 d后，腹主动脉采血2 mL放入抗凝管中，按照TRIzol说明书提取总RNA，应用紫外分光光度计测定RNA纯度和浓度，将提取的总RNA按试剂盒说明书进行逆转录得到相对应的cDNA，进行产物扩增。以cDNA为模板，配制反应体系：SYBR GREEN MasterMix 10 μL，上游引物0.5 μL，下游引物0.5 μL，模板cDNA 1 μL，加双蒸水至总体积20 μL。反应条件：预变性94℃、10 min；变性94℃、10 s，退火60℃、30 s，延伸70℃、20 s，35个循环，每个样本检测3次，取平均数。引物均由上海吉玛制药技术有限公司设计合成，LncRNA-ATB以β-actin为内参，miR-200c以U6为内参，采用2－△△Ct法计算LncRNA-ATB和miR-200c表达水平。引物序列见表 1。
1.5 全自动生化分析仪检测各组大鼠血肌酐（serum creatinine，Scr）和血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）水平各组大鼠腹主动脉采血，离心半径12 cm，3 000 r·min－1离心20 min，取上清‒20℃冰箱保存。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中Scr和BUN水平。
| Primer | Sequence（5'－3'） |
| LncRNAATB | F:-ATTACCATCGATGCTAGCATGCA |
| R:ACAGATACCATTACATGGCGATC | |
| β-actin | F:ATTCGATCAGCTAATATCAGCGCTA |
| R:ACTGCATGCGATGCTAGCAGACTG | |
| miR-200c | F:CAGCTAGCATCGATCGCGATGAGCTA |
| R:CGCATAGCTAGCTACCATAGCAGCTA | |
| U6 | F:AACTCGATCAGATCGGCGACTACT |
| R:AGCTAGTACAGACTCGCTCATCCA |
取保存血清，严格按照ELISA试剂盒说明书操作步骤，检测大鼠血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平，用酶标仪在490 nm波长处测量吸光度（A）值，以标准品浓度和A值绘制标准曲线，分别根据公式Y＝0.970 1X+0.011 8、Y＝1.025 3X－0.001 7和Y＝0.974 6X+0.011 4计算待测样品IL-6、IL-8和TNF-α水平。
1.7 各组大鼠肾组织病理学观察及AR分级采血完毕，处死各组大鼠，无菌摘取左肾并切分成两半，一半置于体积分数为10%中性甲醛保存备用。取中性甲醛中保存的肾组织，常规石蜡包埋、切片、苏木精-伊红（HE）染色，置于光镜下观察大鼠肾组织病理形态表现。AR的诊断参照Banff 2007移植肾病理学分类标准[5]，按照严重程度分为7级：正常、临界性改变、Ⅰa级、Ⅰb级、Ⅱa级、Ⅱb级和Ⅲ级。AR分级半定量评分：正常为0分，临界性改变为1分，Ⅰa为2分，Ⅰb级为3分，Ⅱa级为4分，Ⅱb级为5分，Ⅲ级为6分。
1.8 RT-PCR法检测各组大鼠肾组织中TLR4、MyD88中NF-κB mRNA表达水平采血完毕，处死大鼠，无菌摘取左肾并切分成两半，一半置于液氮中保存备用。取液氮中保存的肾组织100 mg，按照TRIzol试剂盒说明书提取总RNA，测定RNA纯度和浓度后进行cDNA逆转录，配制20 μL反应体系：模板cDNA 2 μL，上下游引物各2 μL，Taq DNA聚合酶10 μL，双蒸水6 μL。以转录产物cDNA为模板，以β-actin为内参，进行PCR扩增。扩增条件：预变性95℃、10 min，变性95℃、60 s，退火55℃、30 s，延伸65℃、30 s，共40个循环。各组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA表达水平按2－ΔΔCt法计算。引物序列见表 2。
| Gene | Sequence（5'－3'） |
| TLR4 | F:5'-CTTAGATACCATCGATAATGCGCCA-3' |
| R:5'-AGCTAGCGCATAGCATCGATGACG-3' | |
| MyD88 | F:5'-ACGATTCATCGATCTGATGACTA-3' |
| R:5'-CGAACATAGGGCACTAGCTACAT-3' | |
| NF-κB | F:5'-ACGATCGAGCAGTAGCTAAATGCTATC-3' |
| R:5'-CTTACGATCGATGGATCGTAGCTAGAT-3' | |
| β-actin | F:5'-ACTTAACTAGTACTAGCGACAGG-3' |
| R:5'-CTATCAGCTATCGTCGAACTGAT-3' |
取液氮保存的肾组织100 mg，在液氮中研磨后离心取上清，BCA试剂盒检测蛋白浓度，制备蛋白样品，蛋白上样进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨（SDS-PAGE）凝胶电泳，电转至硝酸纤维素膜，5%脱脂牛奶孵育2 h，加入稀释的一抗TLR4（1︰1 000），MyD88（1︰1 000）、NF-κB（1︰1 000）和β-actin（1︰1 000），4℃摇床封闭过夜，洗膜后加入稀释的二抗（1︰4 000）于室温下摇床孵育1 h，洗膜后加入ELC试剂显影，暗室下曝光成像。采用Image J软件分析图像，计算TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平。目的蛋白表达水平＝目的蛋白条带灰度值/β-actin蛋白条带灰度值。
1.10 统计学分析采用SPSS 21.0统计软件进行统计学分析。采用KS检验数据正态分布，各组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平，血清中Scr、BUN，IL-6、IL-8和TNF-α水平，肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均符合正态分布，以x±s表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，两两组间样本均数比较采用SNK-q检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 各组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平各组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平组间比较差异均有统计学意义（P < 0.01）。与假手术组比较，模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平均升高（P < 0.05），miR-200c表达水平均降低（P < 0.05）；与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较，LncRNA-ATB-shRNA组LncRNA-ATB表达水平降低（P < 0.05），miR-200c表达水平升高（P < 0.05）；模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表 3。
| (x±s) | |||||||||||||||||||||||||||||
| Group | n | LncRNA-ATB | miR-200c | ||||||||||||||||||||||||||
| Sham operation | 10 | 0.78±0.08 | 0.94±0.11 | ||||||||||||||||||||||||||
| Model | 9 | 2.31±0.25* | 0.32±0.04* | ||||||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-NC | 9 | 2.26±0.23* | 0.29±0.03* | ||||||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-shRNA | 9 | 1.32±0.15*△# | 0.57±0.06*△# | ||||||||||||||||||||||||||
| F | 149.884 | 181.786 | |||||||||||||||||||||||||||
| P | < 0.01 | < 0.01 | |||||||||||||||||||||||||||
| *P < 0.05 compared with sham operation group; △P < 0.05 compared with model group; #P < 0.05 compared with LncRNA-ATB-NC group. | |||||||||||||||||||||||||||||
各组大鼠血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平组间比较差异有统计学意义（P < 0.01）。与假手术组比较，模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平均升高（P < 0.05）；与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较，LncRNA-ATB-shRNA组大鼠血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平均降低（P < 0.05）；模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表 4。
| (x±s) | |||||||||||||||||||||||||||||
| Group | n | Scr [cB/(μmol·L－1)] |
BUN [cB/(mmol·L－1)] | IL-6 [ρB/ (mg·L－1)] |
IL-8 [ρB/ (mg·L－1)] |
TNF-α [ρB/ (mg·L－1)] | |||||||||||||||||||||||
| Sham operation | 10 | 73.64±9.51 | 8.56±1.39 | 65.26±7.02 | 215.61±22.75 | 45.31±4.75 | |||||||||||||||||||||||
| Model | 9 | 152.43±16.01* | 49.52±5.51* | 133.43±12.56* | 268.52±27.51* | 128.52±13.21* | |||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-NC | 9 | 148.82±15.73* | 53.21±6.02* | 125.68±12.73* | 273.49±28.46* | 131.27±14.08* | |||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-shRNA | 9 | 109.68±10.22*△# | 20.15±2.87*△# | 89.65±10.27*△# | 238.47±24.87*△# | 78.52±8.47*△# | |||||||||||||||||||||||
| F | 76.291 | 242.250 | 82.377 | 10.416 | 143.621 | ||||||||||||||||||||||||
| P | < 0.01 | < 0.01 | < 0.01 | < 0.01 | < 0.01 | ||||||||||||||||||||||||
| *P < 0.05 compared with sham operation group; △P < 0.05 compared with model group; #P < 0.05 compared with LncRNA-ATB-NC group. | |||||||||||||||||||||||||||||
HE染色，假手术组大鼠肾组织无AR，结构清楚；模型组大鼠出现典型AR，表现为炎性细胞浸润、动脉炎症、间质细胞水肿和皮质出血等；LncRNA-ATB-NC组与模型组肾组织病理形态表现相似；LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织病理形态表现较模型组和LncRNA-ATB-NC组均减轻。假手术组、模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组的AR分级半定量评分分别为（0.00±0.00）分、（4.26±0.44）分、（4.54±0.45）分和（1.75±0.18）分。AR分级半定量评分组间比较差异均有统计学意义（F＝425.923，P < 0.05）。与假手术组比较，模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组的AR分级半定量评分均升高（P < 0.05）；与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较，LncRNA-ATB-shRNA组的AR分级半定量评分降低（P < 0.05）；模型组与LncRNA-ATB-NC组的AR分级半定量评分比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见图 1（插页二）。
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| A: Sham operation group; B: Model group; C: LncRNA-ATB NC group; D: LncRNA-ATB-shRNA group. 图 1 各组大鼠肾组织病理形态表现(HE, × 200) Fig. 1 Pathomorphology of kidney tissue of rats in various groups (HE, × 200) |
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各组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA相对表达水平组间比较差异有统计学意义（P < 0.01）。与假手术组比较，模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA表达水平均升高（P < 0.05）；与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较，LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA表达水平均降低（P < 0.05）；模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表 5。
| (x±s) | |||||||||||||||||||||||||||||
| Group | n | TLR4 | MyD88 | NF-κB | |||||||||||||||||||||||||
| Sham operation | 10 | 0.68±0.07 | 0.64±0.08 | 0.73±0.09 | |||||||||||||||||||||||||
| Model | 9 | 1.07±0.12* | 1.13±0.11* | 1.25±0.13* | |||||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-NC | 9 | 1.12±0.13* | 1.08±0.12* | 1.16±0.14* | |||||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-shRNA | 9 | 0.89±0.09*△# | 0.87±0.09*△# | 0.95±0.11*△# | |||||||||||||||||||||||||
| F | 34.913 | 47.159 | 36.608 | ||||||||||||||||||||||||||
| P | < 0.01 | < 0.01 | < 0.01 | ||||||||||||||||||||||||||
| *P < 0.05 compared with sham operation group; △P < 0.05 compared with model group; #P < 0.05 compared with LncRNA-ATB-NC group. | |||||||||||||||||||||||||||||
各组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平组间比较差异均有统计学意义（P < 0.01）。与假手术组比较，模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平均升高（P < 0.05）；与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较，LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平均降低（P < 0.05）；模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表 6和图 2。
| (x±s) | |||||||||||||||||||||||||||||
| Group | n | TLR4 | MyD88 | NF-κB | |||||||||||||||||||||||||
| Sham operation | 10 | 0.35±0.04 | 0.32±0.03 | 0.24±0.03 | |||||||||||||||||||||||||
| Model | 9 | 0.81±0.08* | 0.78±0.09* | 0.85±0.09* | |||||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-NC | 9 | 0.85±0.09* | 0.76±0.08* | 0.79±0.08* | |||||||||||||||||||||||||
| LncRNA-ATB-shRNA | 9 | 0.59±0.07*△# | 0.57±0.06*△# | 0.43±0.05*△# | |||||||||||||||||||||||||
| F | 98.609 | 94.539 | 183.702 | ||||||||||||||||||||||||||
| P | < 0.01 | < 0.01 | < 0.01 | ||||||||||||||||||||||||||
| *P < 0.05 compared with sham operation group; △P < 0.05 compared with model group; #P < 0.05 compared with LncRNA-ATB-NC group. | |||||||||||||||||||||||||||||
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| Lane 1 : Sham operation group; Lane 2 : Model group; Lane 3 : LncRNA-ATB-NC group; Lane 4: LncRNA-ATB-shRNA group. 图 2 各组大鼠肾组织中NF-κB、MyD88和TLR4蛋白表达电泳图 Fig. 2 Electrophoregram of expressions of NF-κB, MyD88, and TLR4 proteins in kidney tissue of rats in various groups |
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ERSD是全球范围内重大公共卫生问题，随着肾移植的逐渐推广，部分患者得到了有效治疗，但术后AR仍然是一个不可忽视的问题，其不仅是造成移植肾失功的危险因素，同时也严重影响移植肾的长期存活。随着免疫抑制剂的不断出现和改进，器官移植排斥反应发生率明显下降，但大量使用免疫抑制剂会给患者带来不良反应[6]。因此，探讨移植免疫相关的分子机制对肾移植AR早期诊断和治疗具有重要意义。LncRNA和miRNA是最重要的2类非编码RNA，均在基因表达调控中起着关键作用。多项研究[7-9]表明：器官移植后LncRNA在免疫排斥受体体内异常表达，可以利用LncRNA作为早期诊断受体对同种异体移植物产生AR的标志物。既往研究[10-12]表明：LncRNA可作为内源竞争性RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）与miRNA直接结合，从而抑制miRNA的活性，调控下游信号通路，进而影响疾病发展。研究[13]显示：LncRNA-ATB与miR-200s也存在上述相互作用，LncRNA-ATB可以与miR-200s结合，抑制miR-200s的表达，促进细胞增殖、迁移和侵袭。
本研究采用同种异体大鼠建立肾移植AR模型，与假手术组比较，模型组大鼠外周血LncRNA-ATB表达水平明显升高，表现出AR典型病理变化，经shRNA干扰载体沉默LncRNA-ATB后，LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平、AR半定量评分及血清中Scr和BUN水平明显降低，肾组织AR病理形态改变减轻，提示肾移植AR大鼠LncRNA-ATB异常升高，可能参与AR发生发展过程，沉默LncRNA-ATB后可减弱肾移植后AR的发展。研究[14]表明：在肾移植术后AR受体肾组织切片中LncRNA-ATB表达水平明显高于对照组，促进供体器官炎症反应。QIU等[15]在对肾移植AR患者和对照肾移植患者的肾脏活检组织中检测到LncRNA-ATB表达，AR患者LncRNA-ATB表达水平较对照组明显上调，与本研究结果类似，进一步提示LncRNA-ATB可能参与大鼠肾移植术后AR进展，沉默LncRNA-ATB有利于减弱AR发展，减轻肾功能损害。
本研究结果显示：与模型组比较，LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中miR-200c表达水平明显升高，提示LncRNA-ATB可能参与调控miR-200c在肾移植大鼠中的表达。刘易[16]研究发现：LncRNA-ATB参与调控miR-200c的表达，LncRNA-ATB可以作为ceRNA竞争性结合miR-200c促进肺上皮细胞纤维化。赵伟等[17]研究显示：LncRNA-ATB与miR-200c竞争性地调控其下游通路发挥对miR-200c的调控作用。本研究与上述研究结果一致，表明LncRNA-ATB与miR-200c在疾病发生发展过程中有关联。miR-200c是一种能够抑制炎症反应的miRNA，与TLR4信号通路关系密切。TLR4信号通路与炎症反应密切相关，在依赖MyD88途径中，通过活化的结构域与MyD88结合，释放NF-κB，活化下游炎症因子（IL-6、IL-8和TNF-α等），促进炎症反应。过表达miR-200c可抑制TLR4信号通路，下调MyD88表达，阻断NF-κB活化，降低IL-6和TNF-α表达[18]。既往研究[19]显示：miR-200c可以通过改变NF-κB活性来调节IL-8表达，过表达miR-200c可以降低IL-8表达。在口腔鳞状细胞癌中，NF-κB激活的同时伴有促炎miRNA表达水平升高及miR-200c表达抑制[20]。本研究中经shRNA干扰载体沉默LncRNA-ATB后，大鼠外周血中miR-200c表达水平明显升高，IL-6、IL-8和TNF-α水平，TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均降低，提示沉默LncRNA-ATB可能通过上调miR-200c表达抑制TLR4/MyD88信号通路发挥抗炎作用。
综上所述，在大鼠肾移植后，沉默LncRNA-ATB可发挥抑制AR及炎症反应发生作用，其机制可能是通过上调miR-200c表达，阻断下游TLR4/MyD88信号通路，进而减弱AR发展，抑制受体组织炎症反应，本研究结果为临床早期诊断和治疗肾移植术后AR提供一定理论依据。
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