吉林大学学报(医学版)  2019, Vol. 45 Issue (05): 1003-1008     DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190505

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郭东北, 唐晨, 张敏, 范春, 岳紫钰, 李佳瑶, 陈群, 赵苒
GUO Dongbei, TANG Chen, ZHANG Min, FAN Chun, YUE Ziyu, LI Jiayao, CHEN Qun, ZHAO Ran
金属离子和小分子物质对耐铬(Ⅵ)菌株M52还原能力的影响
Effects of metal ions and small molecules on reduction of Cr(Ⅵ) resistant strain M52
吉林大学学报(医学版), 2019, 45(05): 1003-1008
Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2019, 45(05): 1003-1008
10.13481/j.1671-587x.20190505

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收稿日期: 2019-03-20
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郭东北, 唐晨, 张敏, 范春, 岳紫钰, 李佳瑶, 陈群, 赵苒. 金属离子和小分子物质对耐铬(Ⅵ)菌株M52还原能力的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2019, 45(05): 1003-1008.
GUO Dongbei, TANG Chen, ZHANG Min, FAN Chun, YUE Ziyu, LI Jiayao, CHEN Qun, ZHAO Ran. Effects of metal ions and small molecules on reduction of Cr(Ⅵ) resistant strain M52[J]. Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2019, 45(05): 1003-1008.
金属离子和小分子物质对耐铬(Ⅵ)菌株M52还原能力的影响
郭东北1 , 唐晨2 , 张敏2 , 范春1 , 岳紫钰2 , 李佳瑶2 , 陈群2 , 赵苒1     
1. 厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室, 福建 厦门 361102;
2. 厦门大学公共卫生学院预防医学系, 福建 厦门 361102
收稿日期: 2019-03-20
基金项目: 国家自然科学基金面上项目资助课题（81673129）；福建省教育厅中青年教师教育科研项目资助课题（JAT160001）；厦门大学大学生创新创业训练计划项目资助课题（2016Y0070）
作者简介: 郭东北(1986-), 男, 安徽省宿州市人, 工程师, 医学硕士, 主要从事环境微生物工程方面的研究。
通信作者: 赵苒, 副教授, 硕士研究生导师(Tel:0592-2880637, E-mail:zhaoran@xmu.edu.cn)
[摘要]: 目的: 研究从厦门近岸海域沉积物样品中分离筛选出的芽孢八叠球菌属菌株Sporosarcina saromensis M52在含不同浓度六价铬[Cr（Ⅵ）]培养基中的生长情况，定位Cr（Ⅵ）还原酶，探讨金属离子和小分子物质对耐Cr（Ⅵ）菌株M52还原能力的影响。方法: 将M52菌株的种子液接种于含不同浓度（0~600 mg·L-1）Cr（Ⅵ）LB培养基中，培养0~48 h后用紫外分光光度法测量600 nm处M52菌液的吸光度（A）值，观察M52菌株在含0、50、100、200、400和600 mg·L-1Cr（Ⅵ）的LB培养基中的生长情况。将M52菌液超声破碎前、破碎后后离心所得胞内和胞外活性物质与对照组M52菌液在37℃、pH 7.5条件下培养0、12、24和48 h，用二苯碳酰二肼分光光度法分别测定溶液中Cr（Ⅵ）的浓度，计算各时间点胞内和胞外活性物质中Cr（Ⅵ）的还原率。在LB培养基中分别加入0.2 mmol·L-1的Mn2+、Fe2+和Cu2+，1 mmol·L-1SDS、1% Triton X-100和吐温80作为处理组，以未作处理的LB液体培养基为对照组，将种子液以4%浓度接种于处理组和对照组，计算M52菌株在0、6、12、24、36和48 h对Cr（Ⅵ）的还原率，分析金属离子和小分子物质处理组中M52菌株对Cr（Ⅵ）还原率的变化。结果: 当Cr（Ⅵ）浓度低于100 mg·L-1时，随浓度增加菌株生长加快；当100mg·L-1≤Cr（Ⅵ）浓度 < 600 mg·L-1时，随浓度增加菌株生长受到抑制；当Cr（Ⅵ）浓度高于600 mg·L-1时，M52菌株几乎不生长。与对照组比较，M52菌株对Cr（Ⅵ）的还原率在细胞内外均升高（P < 0.05），胞内Cr（Ⅵ）的还原率最高。与对照组比较，Cu2+和Fe2+存在情况下M52菌株对Cr（Ⅵ）的还原率升高（P < 0.05），且Cu2+>Fe2+，Mn2+存在情况下M52菌株对Cr（Ⅵ）的还原率降低（P < 0.05）；与对照组比较，小分子物质SDS、Triton X-100和吐温80存在时，M52菌株对Cr（Ⅵ）的还原率降低（P < 0.05），且SDS > Triton X-100 >吐温80。结论: 低浓度Cr（Ⅵ）可以促进M52菌株生长，高浓度Cr（Ⅵ）则会抑制菌株生长，M52菌株对Cr（Ⅵ）的还原主要发生在胞内，Cu2+和Fe2+可促进M52菌株还原Cr（Ⅵ），吐温80、Triton X-100和SDS可抑制M52菌株还原Cr（Ⅵ）。
关键词: 芽孢八叠球菌M52    六价铬    还原酶    小分子物质    金属离子    
Effects of metal ions and small molecules on reduction of Cr(Ⅵ) resistant strain M52
GUO Dongbei1 , TANG Chen2 , ZHANG Min2 , FAN Chun1 , YUE Ziyu2 , LI Jiayao2 , CHEN Qun2 , ZHAO Ran1     
1. State Key Laboratory of Molecular Vaccinology and Molecular Diagnotics, Xiamen University, Xiamen 361102, China;
2. Department of Preventive Medicine, School of Public Health, Xiamen University, Xiamen 361102, China
[ABSTRACT]: Objective: To investigate the growth of Sporosarcina saromensis M52 obtained from the sediment samples in Xiamen, to locate the Cr(Ⅵ) reduetase, and to study the effects of metal ions and small molecules on the reducing ability of Cr(Ⅵ) resisistant strain M52. Methods: The seed solution of M52 strain was inoculated into the LB medium containing different concentrations (0-600 mg·L-1) of Cr(Ⅵ). After cultivating for 0-48 h, the absorbance (A) value of M52 strain liquid at 600 nm was measured by UV spectrophotometry. The growth of M52 strain in LB medium containing 0, 50, 100, 200, 400, and 600 mg·L-1 Cr(Ⅵ) was observed. The intracellular and extracellular active substances obtained by centrifugation of M52 bacteria solution before and after sonication and the M52 in control group were cultured at 37℃ and pH 7.5, respectively. Using diphenylcarbazide spectrophotometry, the concentrations of Cr(Ⅵ) in the solution at 0, 12, 24, and 48 h were measured, and the reduction rates of Cr(Ⅵ) in intracellular and extracellular active substances at each time point were calculated. 0.2 mmol·L-1 Mn2+, Fe2+ and Cu2+, 1 mmol·L-1 SDS and 1% Triton X-100, Tween 80 were added to the LB medium as treatment groups, and the untreated LB liquid medium was used as control group. The seed solution was inoculated in treatment groups and control group at 4% concentration. The reduction rates of Cr(Ⅵ) by M52 at 0, 6, 12, 24, 36, and 48 h were calculated. The changes of the reduction rates of Cr(Ⅵ) by M52 in metal ion and small molecule treatment groups were investigated. Results: When the concentration of Cr(Ⅵ) was lower than 100 mg·L-1, the growth of strain was promoted with the increase of concentration; when the concentration of Cr(Ⅵ) was higher than 100 mg·L-1, the growth of the strain was inhibited with the increase of concentration; when the concentration of Cr(Ⅵ) was higher than 600 mg·L-1, the M52 strain hardly grew. Compared with control group, the reduction rates of Cr(Ⅵ) by M52 occurred both inside and outside the cells were increased(P < 0.05), and the intracellular Cr(Ⅵ) had the highest reduction rate. Compared with control group, the reduction rates of Cr(Ⅵ) by M52 were increased in the presence of Cu2+ and Fe2+ (P < 0.05), and Cu2+ >Fe2+; the reduction rate was reduced in the presence of Mn2+ (P < 0.05). Compared with control group, the reduction rates of Cr(Ⅵ) by M52 were reduced in the presence of small molecules SDS, Triton X-100, and Tween 80, and SDS > Triton X-100 > Tween 80. Conclusion: Low concentration of Cr(Ⅵ) can promote the growth of the M52 strain, and high concentration of Cr(Ⅵ) can inhibit the growth of the strain. The reduction of Cr(Ⅵ) by M52 mainly occurs in the cells. Cu2+ and Fe2+ can promote the reduction of Cr(Ⅵ) by M52.Tween 80, Triton X-100, and SDS can inhibit the reduction of Cr(Ⅵ) by M52.
KEYWORDS: Sporosarcina saromensis M52     hexavalent chromium     reductase     small molecules     metal ions    

重金属铬(chromium, Cr)在电镀、木材保藏、染料生产、合金生产和制革等多行业中的广泛应用造成含Cr废水大量排放。由于Cr在环境中长期存在、不易还原，且具有通过食物链的生物聚集和放大作用，因此人为活动产生未经处理的Cr不仅对环境造成严重的污染[1]，还可能威胁公众健康[2-3]。Cr在环境中通常以三价铬[trivalent chromium, Cr(Ⅲ)]和六价铬[hexavalent chromium, Cr(Ⅵ)]的形式存在。Cr(Ⅲ)较稳定，是对人体有益的微量元素，毒性低；Cr(Ⅵ)具有强烈的生物毒性和极强的水相迁移性[4]，毒性约为Cr(Ⅲ)的100倍，Cr(Ⅵ)的强氧化性使其具有潜在的致癌、致畸和致突变性[5]，致突变性约为Cr(Ⅲ)的1000倍[6]，是国际公认的3种致癌金属物之一，并被美国环境保护局列为A类污染物。如何安全有效地去除环境中的Cr污染，成为亟待解决的问题。将高毒性的Cr(Ⅵ)还原为毒性较低的Cr(Ⅲ)是在工业废水或自然水体中开展Cr(Ⅵ)无害化处理的思路之一[7]。其中，离子交换、膜分离和化学沉淀等传统的物理化学修复方法[8]因工艺程序复杂、治理成本高、易引发二次污染等弊端，在实际应用中备受限制[9]。生物修复作为一种新兴的环境友好型Cr(Ⅵ)污染处理技术，是通过特定生物(主要是藻类、细菌和真菌等微生物)将水或土壤中的污染物还原为低毒或无毒化合物的过程，其具有修复效率高、过程安全和无二次污染等优点[10]，正成为修复环境Cr(Ⅵ)污染的新趋势。

本课题组[11]前期从厦门近岸海域沉积物样品中分离筛选出一株经验证具有高效Cr(Ⅵ)还原能力的芽孢八叠球菌属菌株Sporosarcina saromensis M52，该菌株在pH值≥ 7.5、温度≥ 30℃时，24 h可完全还原100 mg·L－1 Cr(Ⅵ)，对200 mg·L－1 Cr(Ⅵ)的还原率达80%以上。为阐明影响M52还原Cr(Ⅵ)的因素，本实验通过研究不同浓度Cr(Ⅵ)条件下M52的生长情况，菌株胞内、胞外活性物质对Cr(Ⅵ)的还原效果，以及金属离子和小分子物质对M52还原Cr(Ⅵ)的影响，为M52还原Cr(Ⅵ)的条件优化提供实验依据。

1 材料与方法 1.1 菌株、主要试剂和仪器

选用的M52菌株是本实验室从厦门马銮湾近海沉积物经不断富集、筛选而来，经生理生化实验和16S rDNA分子生物学鉴定，确定所筛选的菌种为芽孢八叠球菌属(Sporosarcina sp.)，将其命名为Sporosarcina saromensis M52，简称M52。LB肉汤培养基购自青岛海博生物技术有限公司，重铬酸钾、吐温80、Triton X-100、乙二胺四乙酸二钠、SDS和丙酮等化学试剂均为国产分析纯。VCX130PB型超声波破碎仪(美国Sonics公司)，Epoch2型全波长酶标仪[美国伯腾(BioTek)仪器有限公司]，FE20型pH计和EL204型电子天平[瑞士梅特勒-托利多(METTLER TOLEDO)公司]，GI54TW型全自动灭菌锅[致微(厦门)仪器有限公司]，SW-CJ-2F型超净工作台(上海智诚分析仪器制造有限公司)，U410-86型超低温冰箱(美国NBS公司)。

1.2 种子液配制

取保存于-80℃的M52菌液30~50 μL，置于100 mL的LB培养基中，150 r·min－1震荡培养12~14 h，检测吸光度[A(600)]值达到0.6~0.7时停止培养，即得种子液。

1.3 M52菌株在不同浓度Cr(Ⅵ)中的生长情况

分别配制初始含Cr(Ⅵ)浓度为0、50、100、200、400和600 mg·L－1的LB培养液，按照4%的接种量接种M52种子液，在pH7.5、37℃、150 r·min-1条件下培养，分别在初始时刻(0 h)，12、24和48 h检测A(600)值，以A值反映M52菌株生长情况。

1.4 Cr(Ⅵ)还原酶的提取和定位

将M52菌液离心(4℃、12 000 r·min－1离心5min)，收集上清液即为胞外活性物质；菌液离心去上清，用Tris-HCl(pH 7.5)洗涤菌体，再离心去上清，加入原培养基的1/20体积的Tris-HCl，漩涡振荡。将菌液倒入无菌玻璃容器中，在冰浴条件下超声波破碎，4℃、12 000 r·min－1离心20 min，将上清液转到新的离心管中，即得胞内活性物质[Cr(Ⅵ)还原酶][12]。将上述胞外和胞内活性物质分别加入含100 mg·L－1重铬酸钾溶液中，于培养0、12、24和48 h(37℃、pH 7.5，摇床培养条件下)以二苯碳酰二肼分光光度法分别测定溶液中的Cr(Ⅵ)浓度，计算0、12、24和48 h时Cr(Ⅵ)的还原率。菌株对Cr(Ⅵ)还原率计算：实验初始测得Cr(Ⅵ)浓度记为ρ0，待测时刻测得Cr(Ⅵ)浓度记为ρ1，代入下列公式计算待测时刻菌株的还原率X：X=(ρ0－ρ1)/ρ0×100%。依据各时间点胞外和胞内活性物质中Cr(Ⅵ)的还原率高低判断菌株对Cr(Ⅵ)的还原情况。

1.5 二苯碳酰二肼分光光度法测定不同金属离子组中Cr(Ⅵ)的还原率

分别配制浓度为0.2 mmol·L－1的Mn2+、Fe2+和Cu2+溶液，以不含金属离子的LB液体培养基为对照，在pH 7.5、37℃、150 r·min－1条件下与100 mg·L－1 Cr(Ⅵ)反应0、6、12、24、36和48 h，用二苯碳酰二肼分光光度法分别测定溶液中的Cr(Ⅵ)浓度，计算不同时间点Cr(Ⅵ)的还原率。依据不同金属离子组中Cr(Ⅵ)的还原率高低判断金属离子是否抑制或促进M52还原Cr(Ⅵ)。

1.6 二苯碳酰二肼分光光度法测定不同小分子物质组中Cr(Ⅵ)的还原率

配制浓度为1 mmol·L－1的SDS和1%的Triton X-100、吐温80，以未作处理的LB液体培养基为对照，在pH 7.5、37℃、150 r·min－1条件下与100 mg·L－1 Cr(Ⅵ)反应0、6、12、24、36和48 h，用二苯碳酰二肼分光光度法分别测定溶液中的Cr(Ⅵ)浓度，计算不同时点Cr(Ⅵ)的还原率。依据不同小分子物质组中Cr(Ⅵ)的还原率高低判断小分子物质是否抑制或促进M52还原Cr(Ⅵ)。

1.7 二苯碳酰二肼分光光度法测定溶液中Cr(Ⅵ)及总Cr浓度

参考生活饮用水标准检验方法-金属指标-水质Cr(Ⅵ)的测定——二苯碳酰二肼分光光度法(GB/T 5750.6-2006)检测溶液中的Cr(Ⅵ)浓度；参考水质总Cr的测定法——二苯碳酰二肼分光光度法(GB 7466-1987)测定溶液中总Cr(Ⅵ)浓度。

1.8 统计学分析

采用Excel 2016软件制作图表，应用SPSS 20.0统计软件进行统计学分析。胞内和胞外活性物质对Cr(Ⅵ)的还原率以及金属离子和小分子物质对Cr(Ⅵ)的还原率均服从正态分布与方差齐性，以x±s表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，运用方差分析前还原率数据经平方根反正弦变换处理。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 M52在不同浓度Cr(Ⅵ)中的生长情况

测得各剂量组初始A(600)值为0.068~0.074，表明菌株初始接种量是一致的，M52在各时间点的生长情况见表 1。当Cr(Ⅵ)浓度低于100 mg·L－1时，随浓度增加可促进菌株生长；当100 mg·L－1≤Cr(Ⅵ)浓度 < 600 mg·L－1时，随浓度增加，菌株生长受到抑制。与0 mg·L－1Cr(Ⅵ)组比较，50和100mg·L－1Cr(Ⅵ)浓度时A(600)值升高(P＜0.05)，且浓度越高，菌量越低。100 mg·L－1Cr(Ⅵ)组A(600)值高于0、200、400和600 mg·L－1Cr(Ⅵ)组(P＜0.05)，表明Cr(Ⅵ)浓度为100 mg·L－1时菌量最高；50和100 mg·L－1Cr(Ⅵ)组中，菌量起初增长速度较快，12 h后菌量增长速度变缓。200和400 mg·L－1Cr(Ⅵ)组中，前12 h菌株增长较缓慢，但12 h后菌量增长速度较快。600 mg·L－1 Cr(Ⅵ)组中菌株菌量几乎不增长。见表 1。

表 1 M52菌株在不同时间点不同浓度Cr(Ⅵ)中的生长情况 Tab. 1 Growth of M52 strain in different concentrations of Cr (Ⅵ) at different time points
(n=18, x ±s)
Cr(Ⅵ)
(mg·L－1)
 A value
(t/h) 12 24 48
0 0.36±0.01△ 0.56±0.12 0.76±0.10△
50 0.53±0.03* 0.54±0.03 0.83±0.04
100 0.49±0.05* 0.65±0.11 1.01±0.14
200 0.20±0.04*△ 0.40±0.10*△ 0.72±0.18△
400 0.06±0.01*△ 0.37±0.05*△ 0.74±0.10△
600 0.00±0.00*△ 0.31±0.04*△ 0.26±0.01*△
* P < 0.05 compared with 0 mg·L－1 Cr(Ⅵ) group; △ P < 0.05 compared with 100 mg·L－1 Cr(Ⅵ) group.
表选项
2.2 Cr(Ⅵ)还原酶(活性物质)的定位

胞外活性物质组对Cr(Ⅵ)的还原率明显低于对照组和胞内活性物质组(P＜0.05)。见表 2。

表 2 M52菌株胞内和胞外活性物质作用不同时间后Cr(Ⅵ)的还原率 Tab. 2 Reduction rates of Cr(Ⅵ) after treated with intracellular and extracellular active substances of M52 strain for different time
(n=9, x ±s, η/%)
Group Reduction rate of Cr (Ⅵ)
(t/h) 12 24 48
Control 37.99±3.30 84.98±2.30 88.98±0.50
Intracellular active substance 49.42±5.80 88.78±0.50 96.98±6.20
Extracellular active substance 7.19±6.40*△ 47.98±9.30*△ 49.04±6.20*△
* P < 0.05 compared with control group; △ P < 0.05 compared with intracellular active substance group.
表选项
2.3 二苯碳酰二肼分光光度法测定不同金属离子组作用不同时间Cr(Ⅵ)的还原率

在12和24 h，Cu2+和Fe2+金属离子处理组Cr(Ⅵ)还原率较对照组升高(P＜0.05)，Cu2+和Fe2+不同程度地促进M52对Cr(Ⅵ)的还原，且促进作用为Cu2+> Fe2+；Mn2+处理组与对照组比较Cr(Ⅵ)还原率降低(P＜0.05)，表明Mn2+抑制M52对Cr(Ⅵ)的还原。见表 3。

表 3 不同金属离子作用不同时间后Cr(Ⅵ)的还原率 Tab. 3 Reduction rates of Cr(Ⅵ) after treated with different metal ions for different time
(n=20, x ±s, η/%)
Group Reduction rate of Cr (Ⅵ)
(t/h) 6 12 24 36 48
Control 21.92±5.02 32.36±1.72 57.11±1.20 66.46±2.47 94.78±5.77
Mn2+ 12.39±2.48* 24.21±2.64* 48.31±3.38* 64.62±2.08 94.50±5.05
Cu2+ 27.05±4.35 42.63±2.40* 83.78±2.79* 100.09±0.42* 100.46±0.57*
Fe2+ 22.28±7.13 37.68±1.11* 64.72±1.61* 84.69±1.79* 99.36±0.32
* P < 0.05 compared with control group.
表选项
2.4 不同小分子物质组作用不同时间Cr(Ⅵ)的还原率

SDS、Triton X-100和吐温80的小分子物质处理组在各时间点与对照组比较Cr(Ⅵ)还原率均降低(P＜0.05)，SDS、Triton X-100和吐温80均表现为不同程度地抑制M52对Cr(Ⅵ)的还原。见表 4。

表 4 不同小分子物质作用不同时间后Cr(Ⅵ)的还原率 Tab. 4 Reduction rates of Cr(Ⅵ) after treated with different small molecules for different time
(n=20, x ±s, η/%)
Group Reduction rate of Cr (Ⅵ)
(t/h) 6 12 24 36 48
Control 21.92±5.02 32.36±1.72 57.11±1.20 66.46±2.47 94.78±5.77
SDS 6.15±0.57* 3.68±4.30* 9.73±2.71* 4.69±2.64* 20.82±2.62*
Triton X-100 8.90±2.48* 6.25±3.57* 12.02±1.80* 11.10±1.59* 21.64±2.20*
Tween 80 7.71±2.91* 22.37±3.54* 54.54±1.11 56.93±1.51* 83.60±0.32*
* P < 0.05 compared with control group.
表选项
3 讨论

M52在不同浓度Cr(Ⅵ)中的生长情况显示：Cr(Ⅵ)浓度低于100 mg·L－1时，M52增长速度较快，特别是在12 h内，而当Cr(Ⅵ)≥600 mg·L－1时，菌株几乎不生长，提示适宜浓度的Cr(Ⅵ)可促进M52的生长。部分从Cr污染环境中分离出的耐Cr菌株已被证明具有还原铬酸盐的能力[12-13]。在高浓度Cr(Ⅵ)水平下观察到的菌株生长速率较慢，会使与金属结合的吸附表面减少，还原效率降低。暴露在适量浓度的重金属环境下会引发适应性反应，如诱导金属硫蛋白，从而使细胞对重金属引起的毒性具有抗性[14]。GONZALEZ等[15]认为：Cr(Ⅵ)进入菌体后才被还原为Cr(Ⅲ)。PRIESTER等[16]发现：Pseudomonas putida菌体溶解后释放还原酶催化Cr(Ⅵ)在胞外被还原为Cr(Ⅲ)。胞浆Cr还原酶[12]或膜相关Cr还原酶[17]都可能参与Cr(Ⅵ)的还原。上述研究提示细胞内外均有可能是活性物质(Cr还原酶)还原Cr(Ⅵ)的场所。本研究对Cr(Ⅵ)还原活性物质的定位结果显示：M52对Cr(Ⅵ)的还原在细胞内外均有发生，但以胞内为主，在适宜条件下，菌株M52胞内活性物质对Cr(Ⅵ)的最高还原率为96.98%，高于M52对照组的88.98%。

Cu2+离子可以有效提高Cr(Ⅵ)的还原率。肖伟等[18]研究表明：Cu2+有增强Cr(Ⅵ)还原酶活性的作用，这可能是由于Cu2+是很多还原酶的辅基，其可以运输电子或者作为电子的氧化还原中心，并在某些情况下，以在蛋白质亚基之间起穿梭电子的作用[19]；魏斐等[20]的研究也证实Cu2+对苏云金芽孢杆菌有明显的促进Cr(Ⅵ)还原作用。本研究同样观察到：Cu2+和Fe2+可促进M52对Cr(Ⅵ)的还原，而Mn2+则表现为抑制M52对Cr(Ⅵ)的还原；SDS、Triton X-100和吐温80不同程度抑制M52对Cr(Ⅵ)的还原。本研究结果与魏斐等[20]的研究结果部分一致，其研究显示Triton X-100对Cr(Ⅵ)的还原无明显的影响，而SDS和吐温80则可抑制Cr(Ⅵ)的还原。不同金属离子和小分子物质对M52还原Cr(Ⅵ)能力的不同作用方式提示，在将M52用于修复环境Cr污染的实践中应注意其他因素对还原效率的影响，并可通过添加Cu2+和Fe2+等离子提升修复效果。

Cr(Ⅵ)还原菌在天然水体、土壤和沉积物中大量存在，但迄今从天然环境中发现并筛选出的具有Cr(Ⅵ)还原能力的土著微生物还非常有限，更多的菌株是分离自污染环境[12, 17, 20-22]。源于Cr(Ⅵ)污染地带的微生物因在高Cr(Ⅵ)环境下生存，可能进化出特有的还原机制[15]。本研究所选用Sporosarcina saromensis M52菌株分离自厦门马銮湾近岸海域沉积物样品，是一株首次被报道于近岸海域发现的新型Cr(Ⅵ)还原菌物土著细菌，自然水体和土壤的适应性和实用性好，更适用于科学研究和实际应用。本研究通过对M52中Cr(Ⅵ)还原酶定位及其影响因素初步探讨，为阐明还原酶介导M52还原Cr(Ⅵ)的分子生物学机制、构建高选择性的Cr(Ⅵ)抗性基因工程菌奠定实验基础，具有一定的应用和理论意义。

参考文献
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[2] 胡颖, 操家顺. 植物废料吸附含铬污废水的研究进展[J]. 安全与环境工程, 2016, 23(1): 51–58.
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