北京市首次检出长湾泥沙门菌
  疾病监测  2018, Vol. 33 Issue (3): 251-253

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霍哲, 王永全, 徐俊, 苗芳, 杨元斌
Huo Zhe, Wang Yongquan, Xu Jun, Miao Fang, Yang Yuanbin
北京市首次检出长湾泥沙门菌
The first isolation of Salmonella Jangwani in Beijing
疾病监测, 2018, 33(3): 251-253
Disease Surveillance, 2018, 33(3): 251-253
10.3784/j.issn.1003-9961.2018.03.019

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收稿日期:2017-09-22
北京市首次检出长湾泥沙门菌
霍哲1, 王永全1, 徐俊1, 苗芳1, 杨元斌2     
1. 北京市西城区疾病预防控制中心, 北京 100120;
2. 浙江省宁波市疾病预防控制中心, 浙江 宁波 315020
摘要:对北京市首例婴儿感染长湾泥沙门菌的诊治经过和流行病学调查进行总结,掌握其生物学特性和分子分型特征,新型别的发现丰富了沙门菌血清型的多样性。菌株符合长湾泥沙门菌的表型特征,对15种抗菌药物均敏感,该菌感染与外来宠物龟有关。
关键词长湾泥沙门菌    血清分型    耐药    脉冲场凝胶电泳    北京市    
The first isolation of Salmonella Jangwani in Beijing
Huo Zhe1, Wang Yongquan1, Xu Jun1, Miao Fang1, Yang Yuanbin2     
1. Xicheng District Center for Disease Control and Prevention, Beijing 100120, China;
2. Ningbo Prefecture Center for Disease Control and Prevention, Ningbo 315010, Zhejiang, China
Corresponding author: Huo Zhe, Email:rubyrain121118@hotmail.com.
Abstract: To study biological and molecular characteristics of Salmonella Jangwani isolated for the first time from an infant in Beijing. Systematic biochemical identification, serotype identification, broth micro-dilution and pulsed-field gel electrophoresis were conducted to identify the strain. The new isolation reflected the serotype diversity of Salmonella. The isolated strain had the phenotypic characteristics of S. Jangwani, and it was sensitive to 15 antibiotics. The infection was associated with pet turtle from foreign country.
Key words: Salmonella Jangwani     Serotype     Drug resistance     Pulsed field gel electrophoresis     Beijing    

2017年6月19日,北京市从1例急性重症感染者全血标本中检出1株沙门菌(Salmonella),经形态学、生化反应、血清分型鉴定证实为长湾泥沙门菌(S.Jangwani,17:a:1,5),系北京市首次检出,现将调查结果报道如下。

1 流行病学调查 1.1 发病与诊治经过

病例,女,6月龄。2017年6月12日患儿无故发热(38.0 ℃~38.5 ℃)。13日至北京市仁和医院首诊,血常规实验室检查结果:白细胞10.42×109/L,C-反应蛋白75 mg/L。13-15日静脉滴注厄他培南3 d,治疗后症状好转;17日患儿因继续发热并伴有腹泻症状,大便3~4次/d,再次前往仁和医院就诊并接受治疗,血常规实验室检查结果:白细胞13.57×109 /L,C-反应蛋白 < 10 mg/L。后因头孢类皮试阳性,转入北京儿童医院治疗,临床诊断为急性重症感染并接受治疗。19日复诊发热减轻,偶有咳嗽,无明显喘息及憋闷,无呕吐、无腹泻。北京儿童医院诊断疑似“甲型副伤寒沙门菌”并报告北京市西城区疾病预防控制中心(CDC),并将菌株送至西城区CDC复核。18-22日静脉滴注阿奇霉素和维生素B6共5 d。22日黄色糊状便,镜检白细胞5 /HP,26日黄色软便,镜检白细胞++。

1.2 感染来源调查

回顾性家访调查确认,患儿发病前1个月内无外出就餐和旅游史,家中直系亲属亦无不适。在患儿发病前1个月左右,朋友赠予2只巴西龟,于患儿家中饲养。西城区CDC前往采样,婴儿奶粉、米粉和零食各1份,巴西龟及其水环境和容器各涂抹1份、龟粮和粪便各1份,共9份样品,带回西城区CDC进行分离鉴定。

2 实验室检测 2.1 菌株生化特征及培养特性

每份样本挑取3~ 5个典型菌落,采用梅里埃VITEK 2-Compact全自动细菌生化仪对菌株进行鉴定分型,均为沙门菌属。临床分离的沙门菌(1株)与患儿家中采集的标本分离的沙门菌(5株)不同结果为7项(共64项),分别为L-脯氨酸芳胺酶(ProA)、脂酶(LIP)酪氨酸芳胺酶(TyrA)、D-塔格糖(dTAG)、磷酸酶(PHOS)、β-葡萄糖苷酸酶(BGUR)和ELLMAN(ELLM)反应,其中临床分离株仅dTAG呈阳性,其他均为阴性;患儿家中标本分离株dTAG反应为阴性,其他均为阳性。

2.2 血清凝集试验

根据血清型鉴定结果,参考Kauffman-White抗原表,进行菌株血清型别鉴定。临床分离的沙门菌抗原式是17:a:1,5,为长湾泥沙门菌(S. Jangwani),患儿家中分离的5株沙门菌抗原式是6,7:k:e,n,x,为新加坡沙门菌(S. Singapore)。2.3抗生素敏感试验读取最低抑菌浓度(MIC),根据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的相应标准获得相应敏感(S)、中度敏感(I)和耐药(R)的结果。长湾泥沙门菌和新加坡沙门菌对氨苄西林、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、四环素、萘啶酸、红霉素、头孢西丁、氯霉素、头孢噻肟、头孢唑林、庆大霉素、复方磺胺、阿奇霉素和环丙沙星均敏感。

2.4 脉冲场凝胶电泳(PFGE)

参照美国CDC PulseNet PFGE标准操作程序进行[1]Xba Ⅰ和BlnⅠ37 ℃酶切3 h,初始转换时间2.16 s,终末转换时间63.8 s,电泳时间19 h,沙门菌标准株H9812作为分子质量标准。7株沙门菌经XbaⅠ和BlnⅠ酶切后,将PFGE图谱进行聚类分析,共分为2种带型。5株新加坡沙门菌条带完全相同,提示其均来自1株克隆株,患儿分离株与长湾泥沙门菌(S. JangwaniZhejiang)高度同源,见图 12

图 1 7株沙门菌XbaⅠ酶切的PFGE聚类结果 Figure 1 PFGE results of 7 Salmonella isolates digested by Xba
图 2 7株沙门菌BlnⅠ酶切的PFGE聚类结果 Figure 2 PFGE results of 7 Salmonella isolates digested by Bln
3 讨论

沙门菌血清型别复杂,据已公布的KauffmanWhite抗原表共有2 700多个血清型[2]。我国报道的血清型有300多个[3]。长湾泥沙门菌于1955年首次报道[4],2016年9月浙江省余姚市分离出我国首例长湾泥沙门菌[5]。据报道,长湾泥沙门菌感染与宠物有关,尤其是宠物龟[6-7]。该病例患儿家中恰好饲养2只巴西龟,但采集相关标本后,并未分离到长湾泥沙门菌,而是分离到新加坡沙门菌,提示巴西龟携带沙门菌,具有致病性。采样时间距患儿发病已有3周,推测巴西龟可能携带多种沙门菌,优势型别可能已改变。巴西龟在患儿发病前1个月左右开始饲养,主要由患儿母亲喂食、换水,从患儿的食品中未检出致病菌,患儿无外出就餐史。浙江省病例家中也有1年小乌龟饲养史,但未进行溯源调查。同时发现,北京市和浙江省的2株长湾泥沙门菌PFGE型别高度相似,提示其来自同一克隆株。虽未在巴西龟中分离出同源的长湾泥沙门菌,但结合流行病学调查及2病例的分析,推测长湾泥沙门菌感染与宠物龟有关,可能是患儿母亲在饲养巴西龟的过程中被感染,喂养时传染给患儿。本株长湾泥沙门菌对15种药物均敏感,患儿预后良好。<5岁(尤其是<2岁)的幼儿自身肠道免疫功能尚未发育成熟,抵抗力差,最易被感染。

家庭饲养宠物的情况越来越多,其带来的隐患也逐渐凸显。北京市首次分离出长湾泥沙门菌,并与宠物龟有关。建议幼儿应尽量避免接触外来宠物。长湾泥沙门菌新型别的发现丰富了沙门菌血清型的多样性,并对生物溯源研究有重要公共卫生学意义。

作者贡献:

霍哲  ORCID:0000-0002-1933-8808

霍哲:实验室检测、数据分析及文章撰写

王永全:细菌鉴定,血清分型

徐俊:业务协调与指导

苗芳:药物敏感

杨元斌:实验室结果比对

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